【摘 要】
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鸡毒支原体是鸡慢性呼吸道病的病原体,因其在鸡群中广泛存在而造成很大的经济损失.现在使用的弱毒苗和灭活苗都存在着一些难以克服的缺点,基因免疫和基因工程疫苗等生物技术疫苗的研制已势在必行.而研制基因工程疫苗和基因免疫的关键是免疫保护性抗原基因克隆.为此该实验对鸡毒支原体内蒙古分离株H株的TM-1基因进行克隆和序列分析.根据已发表的MGS株TM-1蛋白基因序列分析设计了一对引物,以H株DNA为模板进行P
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鸡毒支原体是鸡慢性呼吸道病的病原体,因其在鸡群中广泛存在而造成很大的经济损失.现在使用的弱毒苗和灭活苗都存在着一些难以克服的缺点,基因免疫和基因工程疫苗等生物技术疫苗的研制已势在必行.而研制基因工程疫苗和基因免疫的关键是免疫保护性抗原基因克隆.为此该实验对鸡毒支原体内蒙古分离株H<,3>株的TM-1基因进行克隆和序列分析.根据已发表的MGS<,6>株TM-1蛋白基因序列分析设计了一对引物,以H<,3>株DNA为模板进行PCR扩增,得到约0.8Kb的片段,将该产物克隆到PUCm-T载体上,得到重组质粒.经Kieser法、质粒PCR法、PstⅠ单酶切等方法鉴定后,测定H<,3>株TM-1基因序列.并与已知S<,6>株TM-1基因序列进行比较,结果表明,MGH<,3>株与S<,6>株TM-1基因核苷酸序列同一性为96.57﹪,氨基酸同一性为95.42﹪.该研究结果为进一步研究MGH<,3>株的基因免疫和基因工程疫苗等奠定基础.
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