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目的:探讨苦参素(Oxymatrine,OMT)对结肠癌细胞HCT-8及其对长春新碱耐药的HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用及对化疗药的多药耐药逆转作用及可能分子机制。方法:(1)采用四甲基偶氮唑蓝法(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)检测HCT-8/VCR细胞对化疗药长春新碱(Vincristine,VCR)、顺铂(Cisplatin,CDDP)及5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)的多药耐药性。(2)采用MTT法检测苦参素对结肠癌细胞HCT-8及耐药细胞HCT-8/VCR的增殖抑制作用及1mg/ml苦参素作用后对各化疗药耐药性的变化。(3)实验分为HCT-8组、HCT-8/VCR组及HCT-8/VCR+苦参素组,苦参素组经1mg/ml苦参素作用48小时后,于倒置显微镜下观察各组细胞的形态,流式细胞术检测各组细胞内Rho123的荧光强度,qPCR检测ABCB1基因表达,Western blot法检测ABCB1基因编码的P-gp蛋白表达。结果:(1)MTT结果显示,HCT-8细胞对化疗药VCR,CDDP及5-Fu的IC50分别为25.63?3.13,12.33?2.01,2.89?0.62,耐药细胞HCT-8/VCR为320.95?6.44,45.95?4.76,18.32?3.91,两组相比差异均有统计学意义(P<0.001),HCT-8/VCR细胞对VCR,CDDP及5-Fu的耐药倍数分别为12.52,3.73,6.34,提示该细胞为多药耐药细胞,可用于耐药相关实验。(2)苦参素可抑制耐药细胞HCT-8/VCR及其亲本细胞HCT-8的增殖,呈浓度依赖性(P<0.05),选择抑制率低于10%的1mg/ml苦参素浓度作用48h作为后续逆转耐药相关实验。(3)经1mg/ml苦参素作用后,HCT-8/VCR细胞对化疗药VCR,CDDP及5-Fu的敏感性增加,各化疗药IC50均降低(P<0.01),各化疗药耐药性逆转倍数分别为3.44,2.15,2.04。倒置显微镜下显示苦参素作用组细胞生长速度变慢,细胞漂浮死亡增加,可见空泡,贴壁性差。qPCR结果显示,HCT-8组及苦参素作用组ABCB1 mRNA表达均低于HCT-8-VCR组(P<0.01);Western blot结果显示,HCT-8组及苦参素作用组中P-gp蛋白表达也明显低于HCT-8-VCR组(P<0.05)。流式细胞术显示,苦参素作用组平均荧光强度为(23.45±0.64)%,高于HCT-8/VCR组(8.3±2.12)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:苦参素可抑制结肠癌细胞增殖并逆转结肠癌细胞的多药耐药性,其机制可能与抑制ABCB1基因及其编码的P-gp的表达,提高细胞内药物浓度有关。