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目的:探讨miR-200a与MAGED4之间是否存在靶向调控关系,以及miR-200a对胶质瘤迁移侵袭能力的影响。方法:（1）运用多种生物信息学在线软件,获取MAGED4基因的3′UTR下游序列,预测MAGED4潜在的microRNA调控因子及结合位点。运用生物信息学在线软件获取microRNA基因的相关信息;（2）microRNA qRT-PCR:提取总RNA检测正常脑组织和胶质瘤细胞株miR-200a表达量;（3）胶质瘤细胞株中转入外源性miR-200a Minics或Inhibitors,上调或下调miR-200a表达;（4）分别构建MAGED4 3′UTR野生型（WT）和突变型（MUT）荧光素酶报告基因载体(WTMAGED4-3′UTR,MUTMAGED4-3′UTR),将这两种载体分别转入HEK 293T细胞、A172细胞和U87细胞,检测荧光素酶活性,验证miR-200a对MAGED4的靶向调控作用;（5）qRT-PCR和Western Bloting:提取细胞总RNA,合成cDNA,用于qRT-PCR;提取细胞全蛋白进行Western Bloting,通过qRT-PCR和Western Bloting分别检测胶质瘤细胞上调或下调miR-200a后,MAGED4 mRNA和蛋白的表达;（6）细胞迁移和侵袭实验:将miR-200a Minics和Inhibitors分别转入A172细胞、U87细胞和U251细胞,使之miR-200a上调和下调,通过划痕修复和Transwell实验检测肿瘤细胞的迁移能力;通过Transwell Martrigel实验检测肿瘤细胞的侵袭能力。结果:（1）miR-200a是MAGED4的潜在调控因子:综合分析多个生物信息学软件分析数据,结果显示:MAGED4 3′UTR存在miR-200a结合位点,且种子区完全匹配;（2）miR-200a在胶质瘤细胞株中的表达:microRNA qRT-PCR检测结果显示,miR-200a在胶质瘤细胞株（A172、U87和U251）中低表达,与正常脑组织相比,具有显著统计学差异（P<0.01）;（3）将miR-200a Minics、Inhibitors和ngative control（NC）分别转入胶质瘤细胞株（A172、U87和U251）,qRT-PCR检测miR-200a的相对表达量,结果显示NC组和Mock组相比,miR-200a的表达无统计学差异（P>0.05）;但Minics组与Mock组相比,miR-200a的相对表达水平明显升高（P<0.01）,而Inhibitors组miR-200a的相对表达水平则显著降低（P<0.01）;（4）荧光素酶活性检测结果显示:293T、A172和U87细胞中,与WTMAGED4-3′UTR组相比,转染miR-200a NC的WTMAGED4-3′UTR组和MUTMAGED4-3′UTR实验组荧光素酶活性无差异性变化（P>0.05）,而转染miR-200a Minics的WTMAGED4-3′UTR组荧光素酶活性明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）,MUTMAGED4-3′UTR组荧光素酶活性无变化（P>0.05）;（5）miR-200a影响MAGED4表达:胶质瘤细胞（A172、U87和U251）分别转染miR-200a Minics、Inhibitors和ngative control（NC）,qRT-PCR和Western Bloting分别检测MAGED4 mRNA表达和蛋白表达,结果显示:胶质瘤细胞中转染NC,与Mock组相比,NC组MAGED4mRNA和蛋白表达量无差异性变化。转染miR-200a Minics,MAGED4mRNA和蛋白表达量减少,差异有统计学意义（P<0.01）,转染miR-200a Inhibitors,MAGED4 mRNA和蛋白表达量显著升高（P<0.01）;（6）miR-200a影响胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力:划痕实验结果显示:与Mock组相比,NC组划痕愈合率无统计学差异（P>0.05）,而Minics组划痕愈合率明显降低（P<0.01）,Inhibitors组划痕愈合率则明显升高（P<0.01）。Transwell迁移实验结果表明:NC组和Mock组之间,穿膜细胞数无统计学差异（P>0.05）;Minics组与Mock组相比,穿膜细胞数量减少（P<0.01）,而Inhibitors组穿膜细胞数显著增加（P<0.01）;Transwell Matrigel侵袭实验表明:NC组和Mock组相比,穿膜细胞数无差异性变化（P>0.05）;而Minics组与Mock组相比,穿膜细胞数明显减少（P<0.01）,Inhibitors组穿膜细胞数则显著增加（P<0.01）。结论:在胶质瘤细胞中,miR-200a能抑制MAGED4 mRNA和蛋白表达,两者之间存在靶向调控关系;miR-200a可能通过介导MAGED4的表达进而抑制胶质瘤细胞的迁移侵袭。本研究拟为体内动物实验奠定基础,并为进一步揭示MAGED4的表达调控机制提供新的研究方向和科研思路。