荧光材料在生化分析领域中的应用越来越广泛,但是传统的荧光材料在实际使用上具有多种缺陷。传统的荧光材料主要包括有机染料和量子点,相比较而言,有机染料其抗光漂白性差,荧光容易受外界环境的干扰;量子点主要是由重金属元素组成,但是由于尺寸较大和生物毒性,在生物细胞成像和标记等方面受到限制。因此,银纳米簇作为一种新型的荧光材料,具有光稳定性好、量子产率高、尺寸小、生物毒性低和荧光发射波长可调的优点,在生物成像、生物传感、生物标记等领域应用上具有潜在的前景。本论文基于银纳米簇作为荧光标记物,结合分析放大技术手段,如催化发卡组装（CHA）、邻近连接技术（PLA）、等温滚环扩增技术（RCA）等,实现了对血小板衍生生长因子（PDGF-BB）及m RNA的超灵敏检测。本论文主要从以下三个方面进行阐述:1、我们设计了一种简单、灵敏度高的方法来检测PDGF-BB,使用DNA-AgNCs作为荧光标记物进行标记。由于靶蛋白PDGF-BB的存在,根据PDGF-BB特点设计的适体探针可以发生构象转变,折叠成稳定的适体-蛋白质复合物,并引发聚合反应和酶切反应,产生大量可以合成银纳米簇的模板。然后,可通过AgNO₃和NaBH₄化学还原反应,合成具有荧光性质的DNA-AgNCs。适体和PDGF-BB之间具有特异性的相互作用,这使检测方法具有高选择性,并且具有荧光性质的DNA-AgNCs被富含G碱基的DNA链增强,可以进一步提高灵敏度（LOD 0.06 nM）。另外,这种设计仅仅是基于核酸杂交和酶扩增放大技术等,可以通过改变适体序列用于其他生物分子的检测。2、目前,寡核苷酸包封的银纳米簇（DNA-AgNCs）作为信号荧光团已被广泛应用在生物分析领域。在此,我们利用被富含胞嘧啶（C）的长链DNA包裹合成DNA-AgNCs的新方法。在本次实验中,基于末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）-聚合的长链富含胞嘧啶的DNA-AgNCs和核酸外切酶III（Exo III）-辅助的信号放大策略,报道了一种无标记的荧光感测平台,以血小板衍生生长因子（PDGF-BB）作为靶标。在该方案中,适体探针S1可以与PDGF-BB结合,首尾靠近并触发邻近连接效应,然后与探针S2碱基互补配对形成双链复合物。Exo III会切割探针S2,从而导致3’OH末端释放短DNA并触发下一个聚合循环。加入TdT和三磷酸脱氧胞苷（dCTP）后,TdT介导合成富含胞嘧啶的长链DNA,通过AgNO₃和NaBH₄化学还原反应,可以合成为荧光银纳米簇以实现无标记的检测PDGF-BB。我们设计的灵敏度高、成本低的探针用于检测PDGF-BB,检测限低至0.3 pM。基于这种新颖的TdT聚合长链DNA合成银纳米簇的方法,可以构建多功能的传感平台来检测生物分子。3、因为量子点与G-四联体/血红素之间建立关系过于复杂,另一种荧光材料--DNA模板化的银纳米簇（DNA-AgNCs）,由于其合成简单、光稳定性、低毒性,特别是供体和受体模板（DNA序列）的一致性等优点,而引起了很大的关注。受到上述策略的启发,我们设计了在DNA-AgNCs和G-四联体/血红素之间的光诱导电子转移（PET）,并使用这种新型G-四联体/血红素的PET系统开发出一种类似分子信标检测mRNA。本实验主要涉及G-四联体/血红素的形成和猝灭荧光团的过程,这在实际操作中可以避免设计复杂的序列。基于DNA-AgNCs和G-四联体/血红素之间光诱导电子转移,我们设计了检测m RNA的荧光生物传感器。通过上述策略,我们可以获得低背景干扰和高灵敏度,对mRNA的检测限低至1.8 nM。