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池沼公鱼是一种小型淡水经济鱼类,分布广泛,资源丰富。目前,池沼公鱼的研究还都在池沼公鱼的资源分布、增殖及加工等方面,关于池沼公鱼提取物的生理活性、分离纯化等研究还未见报道。本实验室是首次发现池沼公鱼具有抗凝血活性成分,并确定池沼公鱼多糖具有抗凝血活性。因此将池沼公鱼应用于抗凝保健食品和药品的研发,是一个很有创新性的发现,这样不仅大大提高了池沼公鱼的利用价值,也拓宽了它的应用领域,为进一步开发具有抗凝血功效的功能性食品,甚至是安全、有效的新型抗凝药物奠定了基础,提供了依据,具有可观的市场前景,可以创造更大的经济效益。本论文阐述的是从池沼公鱼中提取、分离纯化多糖,并对其抗凝血活性和结构进行初步的研究。1.将池沼公鱼的头、身切分开,经脱脂、碱解等初步处理后得池沼公鱼头粗多糖和身粗多糖得率分别为6.13%和4.29%。2.池沼公鱼粗多糖经脱蛋白,脱色、透析处理得鱼头精制多糖(CZGYT)得率为1.24%、总糖含量为44.45%,鱼身精制多糖(CZGYS)得率为1.20%,总糖含量为32.28%。3.池沼公鱼头精制多糖(CZGYT),经DEAE-52纤维素分离得出四个洗脱峰,分别为多糖CZGYT-1,冻干样占上样量为428.4mg/g,多糖CZGYT-2、CZGYT-3和CZGYT-4,冻干样占上样量分别为88.6mg/g,131.6mg/g,292.8mg/g;池沼公鱼身精制多糖(CZGYS)经DEAE-52纤维素分离得到四个洗脱峰,分别为多糖CZGYS-1,冻干样占上样量为382.8mg/g,多糖CZGYS-2、CZGYS-3和CZGYS-4冻干样占上样量分别为89.2mg/g,128.8mg/g,162.6mg/g。其中,CZGYT-2、CZGYT-3的洗脱峰狭小,无法收集。CZGYS-2、CZGYS-3两个组分不具有抗凝血活性。4.经过Sephadex G-200柱层析纯化后,多糖CZGYT-1洗脱得到的组分为CZGYT-1-1,总糖含量为72.76%,多糖CZGYT-4洗脱得到的组分为CZGYT-4-1,总糖含量为63.28%;多糖CZGYS-1洗脱得到的组分为CZGYS-1-1,总糖含量为66.15%,多糖CZGYS-4洗脱得到的组分为CZGYS-4-1,总糖含量为64.49%。5.池沼公鱼多糖经过Sephadex G-200和紫外分光光度计扫描鉴定纯度、红外光谱分析证实,多糖CZGYT-1-1、CZGYT-4-1、CZGYS-1-1和CZGYS-4-1均具有多糖类物质的特征吸收峰。6.池沼公鱼提取的各个多糖组分分别进行了抗凝血活性检测,显示:加入池沼公鱼头粗多糖的兔子的血浆的TT值为18.5s,APTT值为41.3s,PT值为12.7s;加入池沼公鱼身粗多糖的兔子的血浆的TT值为17.6s,APTT值为40.6s,PT值为12.0s,由此表明,池沼公鱼多糖能显著延长兔子的血浆的TT和APTT值(P<0.05),而对PT值的影响不显著(P>0.05)。池沼公鱼头粗多糖经脱蛋白、脱色后,TT值变为23.1s,APTT值变为46.7s,抗凝血活性显著增强(P<0.05);池沼公鱼身粗多糖经脱蛋白、脱色后,TT值变为23.0s,APTT值变为44.3s,抗凝血活性显著增强(P<0.05)。经Sephadex G-200纯化后的4个多糖组分中,CZGYS-4-1的TT和APTT值为31.2s和69.9s,抗凝血活性最强。在试验范围内,随着池沼公鱼多糖浓度的增加,抗凝血活性增强。