温州蜜柑与有籽甜橙原生质体融合创造无核新种质

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我国作为柑橘起源地,地方良种很多,但栽培品种柚、椪柑及普通甜橙多是有核甚至多核的,因而影响了其商品价值和国际竞争力。有目的地实现我国地方特色品种无核化一直是我国广大柑橘育种工作者的目标。原生质体对称融合不仅能获得体细胞杂种而且还能获得只转移胞质基因组的胞质杂种。温州蜜柑(Citrusunshiu Marc.)为细胞质雄性不育(CMS)柑橘类型,本研究旨在针对性地开展温州蜜柑与其它多籽柑橘类型间的对称融合研究,若能获得二倍体叶肉亲本型胞质杂种,则可能实现温州蜜柑胞质雄性不育性状的有效转移,可一步获得二倍体无核果实;若获得体细胞杂种,则可用于三倍体无核育种。主要研究结果如下:1.以国庆1号温州蜜柑愈伤组织为悬浮系亲本,分别与桃叶橙(C.sinensis(L.)Osbeck)、新会橙(C.sinensis(L.)Osbeck)、早金甜橙(C.sinensis(L.)Osbeck)椪柑(C.reticulata)等中国地方特色柑橘良种的叶肉亲本对称融合,获得国庆1号+桃叶橙再生植株20棵。再生的植株均为四倍体体细胞杂种;SSR分析表明其核基因组来自双亲之和,TAA15位点上检测到其核基因组发生重组。线粒体DNA(mtDNA)的CAPS分析表明再生植株的mtDNA均来自愈伤组织亲本,即国庆1号。cpSSR分析表明再生植株的叶绿体DNA(cpDNA)也来自愈伤组织亲本。其它几个组合仅再生了愈伤组织。2.将本实验室前期融合得到的崇义野橘+枳橙,崇义野橘+早花柠檬体细胞杂种胚状体诱导生芽、生根。其中获得崇义野橘+早花柠檬再生植株9棵,倍性分析表明再生植株中二倍体4株、四倍体2株、六倍体3株;崇义野橘+枳橙获得再生植株53棵,倍性分析表明再生植株均为二倍体,根据成熟叶片的形态可分为柳叶型(7棵)和崇义野橘再生型(46棵)两类。本研究利用原生质体融合技术,最终获得了一批体细胞杂种。获得的可能具有双亲优良性状的体细胞杂种将来可能直接用做接穗,或用于三倍体无核育种;获得的可能带有野生橘有益性状的体细胞杂种,特别是异源四倍体,将可能成为抗性强、矮化的新型砧木。
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