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近年来,越来越多不同种属的生防细菌在生物防治上发挥巨大的开发潜力。但由于生防菌的保存受到各种环境因素的影响,给生物源农药的实际应用带来很大的不便。本文选择了由本实验室分离筛选得到的几株分别来自芽孢杆菌属,假单胞菌属和泛菌属的生防菌为研究对象,对影响利用冷冻干燥方法制备不同属生防菌粉剂存活率的相关因素进行了研究,同时还对生防菌水剂使用和保存中的活菌浓度进行了探讨。本文首先研究了在冷冻干燥方法中不同保护剂和再水化剂对生防菌成团泛菌菌株YT11保护作用的差异,以及不同保存温度对YT11贮藏稳定性和生防活力的影响,探讨冷冻干燥方法制备生防菌粉剂的可行性。结果表明,5%蔗糖是最佳的保护剂,冷冻干燥后可以使YT11菌株在室温25℃条件下存活率达90%以上。以5%蔗糖作保护剂时,5%脱脂奶粉为最佳的再水化剂,室温25℃条件下复苏再水化使YT11菌株复苏率达100%。进一步的贮藏试验结果表明,4℃贮存的冷冻干燥粉剂的活菌存活率显著高于22℃下保存的活菌存活率。对保存24周后的菌剂进行温室生防试验,结果显示,4℃和22℃条件下保存的菌剂对番茄青枯病的防效分别达到71.57%和50.98%。证明了冷冻干燥方法可以制备有效生防菌YT11粉剂。为了进一步研究冷冻干燥方法对制备其他不同属生防菌剂的可行性,本文又研究比较了不同冷冻干燥保护剂和再水化剂对生防菌株芽孢杆菌AR156、假单胞菌2R37和泛菌2Re40的保护作用及复苏能力的差异,并对后期在室温贮藏下各菌株冷冻干燥粉剂的存活稳定性进行了检测。试验结果显示,不同的细菌与不同的保护剂之间存在一定的选择配伍性。5%纤维二糖和5%D-半乳糖在冷冻干燥中分别对2R37和2Re40表现最好的保护效果,冷冻干燥后室温25℃条件下检测细菌存活率分别为98.01%和54.31%。AR156在保护剂5%蔗糖的作用下存活率接近100%。用10%的脱脂奶粉作再水化剂,室温下水化生防菌粉剂可以使三个生防菌复苏率达到最佳水平。在后期室温保存中(25℃),AR156冷冻干燥粉剂保存活力明显好于2Re40和2R37,保存12个月AR156存活率保持在50%以上,而2R37和2Re40粉剂活力只能维持3个月。目前国内的生防菌剂型中水剂还是最广泛的剂型之一,影响生防菌水剂货架期和生防效果的因素中,活菌浓度是最主要和基本的,因此本文还研究了不同浓度的3株生防菌芽孢杆菌AR156、泛菌YT11和假单胞菌ABc9对番茄青枯病的温室防效测定,同时对保存36周后的水剂进行了活性跟踪和防效评价,研究了三株来自不同属的生防细菌水剂生防作用的发挥及水剂保存所需的最佳活菌浓度。试验结果表明,生防菌的防效与其使用的浓度在106-109CFU/ml范围内为正相关,使用的浓度高于109CFU/ml时,生防效果反而下降；当AR156浓度为108CFU/ml,YT11浓度为108CFU/ml,ABc9浓度为109CFU/ml时对番茄青枯病的生防效果最佳,分别为63.06%,49.55%,52.25%。起始保存浓度越高生防菌存活率下降越快。AR156和ABe9的最佳起始保存浓度为109CFU/ml,YT11的最佳起始保存浓度为108CFU/ml。综上所述,实验表明了以5%蔗糖为保护剂、5%脱脂奶粉为再水化剂制备成团泛菌菌株YT1l冷冻干燥粉剂,并于4℃贮存,可以成功制备保持有效生防效果的YT11生防菌剂。本研究还比较了来自三个不同属的生防菌使用冷冻干燥方法制备粉剂对其存活率的影响,进一步表明不同属生防菌在对冷冻干燥的敏感性,以及使用的保护剂和再水化剂都存在一定的差异。本文还说明生防菌的生防效果与使用的活菌浓度并不完全呈正相关趋势,活菌浓度过高时反而会减弱生防菌的保存活力及防治效果。