论文部分内容阅读
柱花草是一种重要的豆科牧草,常与禾本科牧草搭配用于放牧或青饲,产量和品质是衡量柱花草价值的关键指标。柱花草接种根瘤菌后能够进行共生固氮从而提高其产量和含氮量。在根瘤菌生物固氮过程中钼是必不可少的元素,钼过多或过少都不利于柱花草-根瘤菌共生固氮。本研究通过在固体及液体培养基上对4株根瘤菌在不同钼浓度下的生长情况进行定性和定量的测定,确定不同菌株的钼适应范围及最适生长钼浓度;通过砂培试验测定钼对不同菌株与不同基因型柱花草搭配的共生体系的影响,并确定能达到最佳固氮促生效果菌株及、钼浓度及柱花草的搭配;最后通过土培进一步研究和验证不同钼浓度对柱花草-根瘤菌共生体系的影响,确定最佳固氮促生钼浓度,并通过分子手段测定各处理条件下的占瘤率。主要研究结果如下:(1)四株菌株中:LZ3-2和PN13-3对钼的适应范围最广,为0~0.45%,YM11-1为0~0.40%,RJS9-2为0~0.35%;菌株LZ3-2生长的最适钼浓度为0.25%,YM11-1生长的最适钼浓度为0.10%,RJS9-2生长的最适钼浓度为0.05%,PN13-3生长的最适钼浓度为0.15%;在钼浓度当钼浓度超出一定范围值时,根瘤菌的生长受到抑制,甚至比缺钼处理的生长差。(2)通过砂培、土培柱花草,对植株株高、鲜重、含氮量、根瘤固氮酶活性及根瘤数分析的结果表明:对于2个柱花草品种在钼浓度≤0.10%的条件下接种菌株YM11-1和RJS9-2固氮促生能力较强,在0.10%~0.25%的条件下接种菌株PN13-3促生固氮能力较强,在大于0.15%的条件下接种菌株LZ3-2都有较强的固氮促生能力;(3)砂培和土培结果中,接种根瘤菌都能有效的提高植株的耐钼能力,在两种柱花草中,接种菌株RJS9-2提高植株耐钼能力最差,接种LZ3-2提高植株耐钼能力最强。(4)4株菌株与2个柱花草品种结合后LZ3-2、PN13-3的占瘤率都最高,分别为68.67%和80.00%,占瘤率最差的都是钼浓度为0.25%时接种菌株RJS9-2,分别为27.33%和12.33%。(5)在gusA基因标记中,通过水培对标记菌株与出发菌株在两个柱花草上接种后比较根瘤数、含氮量、鲜重、固氮酶活性4个指标,结果表明:标记菌株与出发菌株间差异不显著,gusA基因标记根瘤菌对菌株本身的遗传特性没有影响。