卵母细胞老化会造成卵母细胞质量下降,影响早期胚胎发育以及出生后代的健康。老化的卵母细胞最显著的特征是孤雌激活率上升、MPF活性下降,皮质颗粒排出异常,透明带硬化,受精率下降,易引起基因突变,最终导致细胞凋亡或坏死,妊娠失败。当卵母细胞发生老化时,细胞内代谢异常,引起线粒体活性改变,导致电子呼吸链传递电子过程中,一些电子发生“逃逸”,并与细胞内其他物质相结合,使细胞内氧自由基积累。卵母细胞可以利用谷胱甘肽将其清除,但随着老化的进行,GSH逐渐消耗,导致胞内ROS水平上升,从而引起细胞凋亡,影响卵母细胞质量。现有研究表明,N-乙酰-L半胱氨酸作为谷胱甘肽合成前体、具有抗氧化能力,可以有效清除氧自由基。为探究NAC在排卵后小鼠卵母细胞老化过程中的作用及相关机制,本实验通过添加有不同浓度NAC的培养液,对卵母细胞体外培养12小时,以新鲜卵母细胞为对照,检测并对比多项影响卵母细胞质量的重要指标,如孤雌激活率、ROS水平、线粒体活性及排布、透明带硬化程度、体外受精后的受精率与早期胚胎发育状况等,以探究NAC对卵母细胞老化是否有延缓作用及相关分子机制,得出结果如下:(1)添加NAC,可显著降低排卵后老化卵母细胞对孤雌活化的敏感性,并提高其MPF活性,延缓卵母细胞老化。而添加浓度为2 mM以上(包括2 mM)的NAC具有较显著的延缓作用;(2)在卵母细胞体外培养过程中,添加2 mM NAC促进卵母细胞内谷胱甘肽合成,维持适宜的GSH/GSSG比例,以提高卵母细胞的氧化还原能力,从而降低ROS对卵母细胞造成的损伤;(3)2 mM NAC显著改善老化卵母细胞中线粒体的分布及功能状态,从而提高老化卵母细胞质量;(4)NAC显著抑制老化卵母细胞透明带硬化,抑制老化卵母细胞发生胞质碎裂;(5)2 mM的NAC能够有效缓解卵母细胞老化,提高卵母细胞受精能力和早期胚胎发育能力。