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前言:甘露糖受体(mannose receptor,MR),作为一个固有的模式识别受体,在巨噬细胞、未成熟树突状细胞及一部分内皮细胞中都有表达,是一种重要的抗原提呈分子和信号转导受体。急性肺损伤(acute lung injury,ALI),是呼吸系统疾病中的危重症,其定义是:心源性以外的各种肺内外致病因素引起的急性,进行性缺氧性呼吸衰竭,是肺部炎症和通透性增加的综合征。对慢性鼻窦炎和鼻息肉病人的研究发现,鼻息肉患者的鼻窦粘膜处巨噬细胞MR的mRNA有明显的升高。Marzolo MP亦发现脑内巨噬细胞—脑小胶质细胞表面的MR能被地塞米松上调。但是甘露糖受体在急性肺损伤中的表达情况及其在急性肺损伤中的作用机制,目前国内外还未有报道。目的:研究甘露糖受体在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤中的表达情况,并探讨其可能的作用机制,为临床药物治疗找寻新的靶点。方法:雄性SD小鼠,随机分为3组:1.对照组;2.模型组;3.地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5 mg/kg)组。通过气管内滴注LPS(3 mg/kg)建立ALI模型,地塞米松组在滴注前5分和滴注后3小时,尾静脉注射地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5mg/kg),对照组注射相应剂量0.9%生理盐水。滴注LPS 6小时后处死动物,行肺湿/干重比,肺渗透指数(pulmonary permeability index,PPI),支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞和中性粒细胞计数,肺和BALF中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotacticprotein 1,MCP-1)活性,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-10检测,并观察光学显微镜下肺损伤的程度。本实验通过实时定量RT-PCR测定各组中甘露糖受体(MR)的含量,并用Western Blot检测核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)的蛋白表达水平,观察急性肺损伤中甘露糖受体的表达情况及其与核转录因子-κB的关系,探讨甘露糖受体在急性肺损伤中的作用及其可能的机制。结果:1.甘露糖受体在LPS诱导的急性肺损伤中表达下调:本实验以气管内滴入LPS诱导小鼠产生ALI,动物模型表现出肺泡内PMN的大量渗出,肺泡壁对液体和蛋白的渗透性升高,肺湿/干重比、PPI、BALF中白细胞和PMN计数、肺匀浆中和BALF中MPO、TNF-α和IL-1b水平显著增高,以及肺部的ALI的病理损伤改变。以上均为小鼠ALI的基本特征,提示本实验小鼠ALI模型建立成功。实时定量RT-PCR检测发现急性肺损伤模型中甘露糖受体mRNA的量下降,比正常对照组下降了约20.1%(P＜0.05)。2.地塞米松拮抗LPS诱导的急性肺损伤炎症并上调MR:LPS组的肺湿/干重比(4.67±0.37)与正常组(4.07±0.31)比较明显升高(P＜0.05),DXM(0.5 mg/kg)静脉注射明显抑制LPS诱导的肺部水肿(P＜0.05)。LPS组肺匀浆中MPO水平升高,与对照组比较上升了58.8%(P＜0.05),地塞米松减少LPS诱导的肺匀浆中MPO活性的上升(P＜0.05)。LPS组的BALF中的TNF-α、IL-1b和MCP-1水平显著上升,分别达到对照组的24倍、12倍和16倍(P＜0.01),DXM(0.5mg/kg)静脉注射明显抑制TNF-α、IL-1和MCP-1(p＜0.05)的活性。实时定量RT-PCR检测发现地塞米松组中甘露糖受体mRNA的量上调,比LPS组增加了约66.3%(P＜0.05)。3.上调甘露糖受体能抑制LPS诱导的急性肺损伤中NF—κB/p65的表达:WesternBlot检测显示,在正常肺组织中有低水平的NF—κB/p65表达,经LPS(3 mg/kg)刺激6h后肺组织中NF—κB/p65表达明显增高,达到正常对照组的4.5倍。预先给予DXM(0.5mg/kg)静脉注射,能明显抑制LPS所诱导的急性肺损伤中NF—κB/p65高水平表达。结论:甘露糖受体在脂多糖诱导的急性肺损伤中表达下调,通过上调其水平能抑制急性肺损伤肺组织中NF—κB/p65蛋白的表达,提示甘露糖受体可能与NF-κB信号通路有关,进而在mRNA水平上抑制LPS所致的急性肺损伤中TNF-α、IL-1β等炎症因子的表达,减轻急性肺损伤中的炎症反应。