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本研究用已构建的表达禽(番鸭)呼肠孤病毒S3和S4 ORF2基因的原核表达载体pET-30a／S3、pET-30a／S4 ORF2转化大肠杆菌BL21，挑取阳性克隆培养，IPTG诱导后裂解菌体作SDS-PAGE，分别出现大小约36KD和43KD的表达产物，经Western-blot验证重组蛋白具有DRV抗原性，通过摸索不同诱导时间、不同诱导所需IPTG浓度、不同诱导温度优化了σB和σC蛋白的表达条件：对σB，用终浓度为0.5mM的IPTG诱导，于37℃振荡培养5h；对σC用终浓度为0.8-1.0mM的IPTG诱导，于37℃振荡培养3h。融合蛋白以包涵体的形式存在，分别采用螯合亲和层析和尿素洗涤纯化了包涵体中的融合蛋白。利用纯化的DRV重组σC蛋白作为抗原致敏乳胶，并优化了致敏乳胶的最佳浓度，温度和时间，初步建立了检测DRV抗体的乳胶凝集试验(LAT)。试验结果表明，抗体致敏乳胶敏感性高，特异性强，稳定性好。用1日龄雏番鸭免疫评价了禽(番鸭)呼肠孤病毒衣壳蛋白σB和σC亚单位疫苗在番鸭体内的免疫原性。接种σB，σC和σB+σC重组亚单位疫苗的番鸭用相同病毒攻毒后分别出现50％，40％和30％的死亡率，阳性对照组番鸭攻毒后出现70％的死亡率。根据本实验室测得的禽(番鸭)呼肠孤病毒YB株S3和S4 ORF2基因序列，采用SOPMA法、Gamier-Robson法、Chou-Fasman法和Karplus-Schultz法方法预测了其结构蛋白的二级结构，用Hopp-Woods方法对结构蛋白的亲水性进行了分析，用Emini方法预测了σB和σC蛋白的表面可能性，以Jameson-Wolf法和吴玉章等建立的方法预测了蛋白的抗原指数，然后综合分析了σB和σC蛋白的B细胞抗原表位。结果显示σB蛋白B细胞表位可能在136～150、157～167及240～249区域或其附近，σC蛋白B细胞表位可能15～27、36～49、40～49及90～98区域或其附近，在这几被预测的表位均含有β-转角和无规卷曲结构。本研究为实验确定σB和σC蛋白的B细胞表位和反向疫苗学设计提供了理论基础。