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目的:研究凝胶包被的人胎盘来源的间充质干细胞(human placental derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)诱导的大鼠实验性结肠炎是否有治疗作用及可能的治疗机制。为应用间充质干细胞局部/原位治疗炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)提供理论依据。方法:分离、培养、鉴定hPMSCs,构建含荧光素酶(luciferase)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)双报告基因的慢病毒转染hPMSCs,将hPMSCs包被于凝胶中制成可用于灌肠的剂型。大鼠随机均分为3组:对照组、模型组、细胞治疗组。禁食24小时后,对照组大鼠接受1ml生理盐水灌肠,模型组和细胞治疗组大鼠接受1ml TNBS/乙醇混合溶液灌肠。各组大鼠在造模的第3天接受治疗,对照组、模型组大鼠接受1ml空白凝胶灌肠,细胞治疗组大鼠接受1ml细胞密度1*106/ml凝胶包被的hPMSCs灌肠。造模第0天起记录大鼠体重、粪便形状、精神、饮食、活动量、皮毛光泽等状态,计算每天疾病活动指数(Disease activity index,DAI)。造模第7天杀鼠取材,计算各组大鼠结肠组织的HE病理组织学评分、结肠长度、应用RT-PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠组织中和心脏血清中促炎细胞因子。RT-PCR检测结肠组织中T细胞亚群转录因子T-bet、GATA-3、ROR-γt mRNA水平和巨噬细胞极化蛋白CD68、CD163、MCP-1 mRNA水平。活体成像技术和免疫荧光技术检测luciferase/GFP阳性的hPMSCs信号以明确灌肠后的hPMSCs在大鼠肠道的存活情况和分布。结果:凝胶包被的hPMSCs可以明显改善实验性大鼠结肠炎的体重减轻症状和组织病理改变。hPMSCs能降低大鼠结肠组织中和心脏血液上清中的促炎细胞因子IL-17,IL-1β,TNF-α,IFN-γ和IL-6的mRNA水平和蛋白水平,提高抗炎因子的TGF-βmRNA水平和蛋白水平。凝胶包被的hPMSCs能调节Th细胞亚群平衡和巨噬细胞极化方向。活体成像及免疫荧光结果表明只有少量的luciferase/GFP阳性的hPMSCs存在于肠道。结论:凝胶包被的hPMSCs对TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎具有治疗作用。hPMSCs可以降低结肠组织和心脏血液上清中的促炎因子的m RNA水平和蛋白水平和提高抗炎因子的mRNA水平和蛋白水平;hPMSCs可以调节T细胞亚群转录因子平衡和巨噬细胞的极化方向。凝胶包被的hPMSCs只有少量在大鼠肠道内存活,但仍有很好的治疗效果,我们推测凝胶包被的hPMSCs可能是通过分泌可溶性细胞因子来治疗TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎。