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背景与目的:排卵障碍性不孕症是一种很常见的不孕症之一,其发病率约占不孕症的20%-40%[1]。由于本病给许多家庭和和社会带来了严重的影响,已经成为全世界普遍存在的问题。现代医学研究认为,排卵障碍是指黄体功能不全、无排卵、卵泡发育不良或者卵泡成熟后不能正常排出,其发病机制多为多种因素引起的下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调引起的内分泌功能障碍,在临床多表现出闭经、月经稀发、功能失调性子宫出血、不孕症等症状。现代社会人们承受着多方面的压力,研究表明[2]慢性应激可以导致焦虑、抑郁等情志障碍。长期的慢性应激[3],可导致女性卵泡发育不良,与多囊卵巢综合症、排卵障碍、月经失调、不孕症等女性生殖内分泌疾病相关。近年来,中医药在促进卵泡的生长和发育、调整月经周期、提高受孕率方面取得了较好的效果,对未来排卵障碍性不孕症的进一步研究和治疗有很大的帮助,促进了医学事业的发展。祖国医学研究认为,不孕症发病的机理主要是肾虚、冲任失调,因此补肾调冲法成为了治疗不孕症的主要方法。除了采用药物治疗之外,针灸、埋线、心理治疗等疗法也在临床开展,其中五行音乐疗法在缓解患者的焦虑、肝郁的方面有较好的效果[4]。本课题组前期在临床上观察了补肾调冲方结合心理干预对肾虚肝郁型排卵障碍性不孕症患者的疗效,并表明补肾法、调冲法可以提高卵巢的功能,促进卵泡生长、发育和成熟,有利于增加各级卵泡的数量,改善广大女性备孕期间的心理焦虑状态,提升临床不孕症者的受孕率。本研究拟在原来课题的基础上,运用补肾调冲方联合五行音乐疗法,通过观察动情期小鼠血清生殖激素的水平进行卵巢功能的评价,为临床上更好的治疗不孕症提供治疗方法和理论依据。方法:6-7周龄未交配、健康成年雌性KM种小鼠,连续阴道涂片一周后选择生理周期规律的60只,体重27—32g,饲养在清洁的隔离笼内,自由饮水和摄食,饲养室通风,清洁,温度20±2℃,湿度约保持在50%,控制光照12小时,黑暗12小时。按随机法分为四组:空白组（A组）,肝郁模型组（B组）,补肾调冲方组（C组）,补肾调冲方联合五行音乐组（D组）,每组15只,采用慢性不可预见应激法复制肝郁证模型,模型复制成功以后,每天阴道涂片观察小鼠动情周期,并给予A组自由活动,自由摄食水;B组灌服生理盐水25ml∕Kg,1次∕日;C组灌服补肾调冲方,相当于1ml含生药2.3g,每次灌服25ml∕Kg,1次∕日;D组灌胃药物及方法同C组,同时再给予五行音乐疗法。观察比较各组小鼠一般情况,动情周期,动情期小鼠血清性激素（E2、P、FH、FSH）水平、子宫内膜厚度和子宫卵巢组织形态学的变化,并进行统计学分析。结果:（1）小鼠一般情况造模成功后,与A组比较,B、C、D三组小鼠均呈现一系列肝郁症状,比如精神萎靡,自主活动减少,被毛干枯凌乱等。治疗后C、D组小鼠的状态有所好转,B组小鼠状况较差。（2）小鼠动情周期B组较A组,动情期小鼠的数量减少,动情周期延长,有统计学意义（P﹤0.05）;与B组比较,C、D两组动情小鼠的数量明显增多,动情周期缩短,其中D组尤为明显,其结果有统计学意义（P﹤0.05）;C组与D组相比较,动情小鼠的数量和动情周期有一定的差别,但无统计学意义（P﹥0.05）。（3）动情期小鼠血清生殖激素的比较B组小鼠血清中FSH水平较A组降低,但差异无统计学意义（P﹥0.05）;治疗后,C组、D组小鼠血清FSH水平显著高于B组（P﹤0.05）;C组、D组小鼠血清FSH水平之间无统计学意义（P﹥0.05）。结果见表2。A组与B组比较、C组与B组比较、D组与B组比较、C组与D组比较,LH水平差异均无统计学意义（P>0.05）。B组小鼠血清中E2水平较A组无显著性差异（P﹥0.05）,治疗后D组小鼠血清E2水平显著高于B组（P﹤0.05）,C组较B组无显著性差异（P﹥0.05）;D组与C组之间血清中E2水平有微小差别,但无统计学意义（P﹥0.05）。结果见表3。与A组比较,B血清P水平无明显变化,差异无统计学意义（P﹥0.05）。与B组比较,D组血清P水平升高,差异有统计学意义（P<0.05）,D组比C组略升高,但无统计学意义（P﹥0.05）。结果见表4。（4）动情期小鼠子宫内膜厚度的比较采用多功能图像分析仪于显微镜下测量各组小鼠子宫内膜的厚度。A组与B组比较、C组与B组比较、D组与B组比较、C组与D组比较,其差异均无统计学意义（P>0.05）,结果见表5。（5）动情期小鼠子宫、卵巢组织形态学的比较显微镜下观察各组小鼠子宫内膜形态及卵泡数目发现,A组较B组小鼠子宫内膜血供丰富、腺体数量增多、卵泡数目增多;与B组比较,C组、D组两组小鼠子宫内膜颜色红润,血供较丰富,腺体数量较多;卵巢组织中卵泡数目较多,可见初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡,其中D组略优于C组。结论:本文报告了补肾调冲方联合音乐疗法对肝郁型小鼠生殖激素的影响。实验结果提示肝郁状态下的小鼠,其动情周期延长,同一时间段中动情小鼠的数量减少。动情期小鼠血清生殖激素水平紊乱;子宫内膜血供及腺体数量减少,卵泡数目减少,提示生殖功能低下。补肾调冲方联合五行音乐能够缩短小鼠的动情周期,增加动情小鼠的数量;能够提高肝郁型雌性小鼠动情期血清生殖激素的水平;有可以促进动情期小鼠子宫血管的血液供应,使子宫内膜腺体明显增生的趋势;有可以提高动情期小鼠卵巢的功能状态,增加初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡的数量,有利于卵泡的生长和发育的趋势。音乐疗法对于缓解小鼠肝郁状态有一定的促进作用,考虑可能影响了下丘脑—垂体—卵巢轴的调节。本研究为补肾调冲方联合五行音乐疗法在临床上治疗肾虚肝郁型排卵障碍性不孕症提供了治疗方法和理论依据。