【摘 要】
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目的:探讨TGF-β1 siRNA表达对肝癌HepG2细胞株耐药性的逆转作用。方法:采用顺铂IC50值1/5浓度培养HepG2细胞3d、5d、7d,流式细胞仪分析细胞周期。根据TGF-β1基因的编码区域
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目的:探讨TGF-β1 siRNA表达对肝癌HepG2细胞株耐药性的逆转作用。方法:采用顺铂IC50值1/5浓度培养HepG2细胞3d、5d、7d,流式细胞仪分析细胞周期。根据TGF-β1基因的编码区域设计了含23个基因的TGF-β1基因特异性siRNA,脂质体介导下转染入分别培养3d、5d、7d的HepG2/CDDP细胞。RT-PCR分析TGF-β1 mRNA的表达;MTT法分析转染前后HepG2/CDDP细胞对顺铂的药物敏感性改变;免疫组化法分析TGF-β1以及P-糖蛋白(P-gp)的表达情况。结果:建立了HepG2/CDDP动态的耐药模型,流式细胞仪分析显示HepG2/CDDP细胞停留于G0/G1期;TGF-β1特异性siRNA转染后,HepG2/CDDP细胞的TGF-β1 mRNA、TGF-β1蛋白及P-gp表达明显减少,对顺铂的敏感性增强;培养3d、5d的HepG2/CDDP细胞组P-gp表达与其对顺铂的敏感性较转染前无明显改变。结论:HepG2/CDDP动态耐药模型的细胞周期阻滞于G0/G1期;TGF-β1siRNA转染后可以阻断TGF-β1和P-gp的部分表达,并使肝癌细胞对顺铂的敏感性增强;TGF-β1 siRNA可以部分逆转人肝癌细胞株HepG2对顺铂的耐药性。
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