电化学甘油传感器的制备及其性能研究

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甘油,是葡萄酒发酵初期的主要副产物,是鉴定葡萄酒品质优劣的重要依据之一。正常情况下,葡萄酒发酵产生的甘油浓度通常为1-10g·L-1,甘油与乙醇的比值约为7%-10%。而在葡萄酒的生产过程中,部分不法商贩把甘油添加到勾兑的葡萄酒中以增强葡萄酒口感的复杂性,这种行为在我国以及其他国家都是严厉禁止的。因此,实现葡萄酒中甘油含量的快速、有效检测具有重要的现实意义。本论文基于纳米氧化锌、羧基化纳米氧化锌、生物酶和镍纳米粒子等材料,构建了甘油电化学酶生物传感器和无酶传感器,以期有效地对葡萄酒中的甘油含量进行快速检测。从载体材料和催化材料的制备、生物酶和金属催化剂在电极表面的固定方式等方面进行了研究,主要内容如下:用直接沉淀法合成纳米氧化锌材料,利用壳聚糖将制备的纳米氧化锌材料、甘油激酶和甘油三磷酸氧化酶包埋在电极表面,制得应用于甘油检测的酶修饰电极,采用循环伏安法、交流阻抗谱与计时电流法等电化学方法研究其电化学性能。结果表明:该体系传感器检测甘油时发生的反应过程是扩散控制过程,而非表面吸附控制过程。其在0.025m M-50m M范围内与甘油浓度呈良好的线性关系,其线性方程为I(μA)=0.99C(m M)+32.408,相关系数R2=0.9989,检测限为1.82×10-5 M(S/N=3),灵敏度为14.14 m A·mol-1·cm-2,表观米氏常数KMapp为1.5×10-5M;此外,其还具有很好的重现性、稳定性、抗干扰性,可以有效检测葡萄酒实际样品中的甘油含量。利用自由基聚合法对纳米氧化锌材料进行功能化改性,制得羧基化纳米氧化锌材料。在电极表面电沉积壳聚糖,再在电力的作用下使羧基化纳米氧化锌与壳聚糖共价结合,最后将甘油激酶和甘油三磷酸氧化酶滴加在电极表面完成其与羧基化纳米氧化锌的共价结合,制得检测甘油的酶修饰电极,采用循环伏安法、交流阻抗谱与计时电流法等电化学方法研究其电化学性能。结果表明:该传感器检测甘油时发生的反应过程是扩散控制过程,而非表面吸附控制过程。其在0.025 m M-60 m M范围内与甘油浓度呈良好的线性相关性,线性方程为I(μA)=1.078C(m M)+39.864,相关系数R2=0.9982,检测限为1.34×10-5 M(S/N=3),灵敏度为15.40 m A·mol-1·cm-2,表观米氏常数KMapp为1.3×10-5M;其具有很强的重现性、稳定性、抗干扰性,能对葡萄酒实际样品中的甘油含量实现有效检测。通过对比可知,此方法制备的甘油酶传感器的总体性能优于前一体系包埋滴涂法制备的甘油酶传感器。利用全氟磺酸树脂溶液将制备的纳米氧化锌材料先固定在电极表面,利用电沉积法在纳米氧化锌材料表面沉积镍纳米粒子,最后再将全氟磺酸树脂溶液滴加在镍纳米粒子表面,制得检测甘油的非酶修饰电极,采用循环伏安法、交流阻抗谱等电化学方法研究其电化学性能。结果表明:该传感器检测甘油时发生的反应过程是扩散控制过程,而非表面吸附控制过程。其在0.2 m M-60 m M范围内与甘油浓度呈现良好的线性关系,其线性方程为I(μA)=2.969C(m M)+151.281,相关系数R2=0.9955,检测限为7.35×10-5M(S/N=3),灵敏度为42.02 m A·mol-1·cm-2;且其受温度影响较小,具有很好的重现性、稳定性和抗干扰能力,能有效地对葡萄酒实际样品中的甘油含量进行检测。本研究中制备的电化学酶生物传感器和无酶传感器均有很好的性能,可将其应用于葡萄酒中甘油含量的快速检测,对甘油传感器的研究具有一定的参考和实用价值。
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