TNF-α、IFN-γ诱导人角质形成细胞β-防御素表达的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyan4321
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目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)诱导人角质形成细胞系(Hacat细胞)β-防御素(hBD)表达情况,探讨人角质形成细胞hBD诱导表达途径的可行性,了解β-防御素表达调控的基本规律,为指导β-防御素的进一步研究和开发提供理论依据。方法:将Hacat细胞培养于含有10%胎牛血清的DMEM培养基中,取生长旺盛的细胞分为八组:12小时对照组、24小时对照组、TNF-α干预12小时组、TNF-α干预24小时组、IFN-γ干预12小时组、IFN-γ干预24小时组、TNF-α+IFN-γ干预12小时组、TNF-α+IFN-γ干预24小时组,将40ng/ml TNF-α、40ng/ml IFN-γ、40ng/ml TNF-α+40ng/mlIFN-γ分别加入相应的培养瓶中与Hacat细胞共培养12小时、24小时后提取总RNA,RT-RCR(反转录聚合酶链反应)方法检测hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表达,使用SPSS统计软件(版本:11.0)对实验数据进行析因设计的方差分析。结果:HBD-2mRNA、hBD-3mRNA在Hacat细胞中均有微量表达;TNF-α干预组Hacat细胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA相对对照组表达增高(p<0.05),且TNF-α干预12h时Hacat细胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表达量高于干预24h时的表达量;IFN-γ干预组Hacat细胞中hBD-3mRNA相对对照组表达增高(p<0.05),且IFN-γ干预12h时Hacat细胞中hBD-3mRNA的表达量高于干预24h时的表达量,但IFN-γ对Hacat细胞中hBD-2mRNA的表达无作用(p>0.05):在诱导Hacat细胞hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表达的过程中,时间、TNF-α、IFN-γ三因素具有交互作用(p<0.05),TNF-α与IFN-γ联合干预Hacat细胞12h时,hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表达量最高。结论:人角质形成细胞可以产生微量hBD-2、hBD-3,TNF-α能够诱导人角质形成细胞产生hBD-2和hBD-3,且具有时间依赖性,而IFN-γ仅能诱导人角质形成细胞产生hBD-3,且具有时间依赖性,同时在诱导人角质形成细胞hBD-2、hBD-3表达的过程中,时间、TNF-α、IFN-γ三因素具有交互作用,人角质形成细胞产生的和诱导产生的β-防御素可能有助于抗感染、抗肿瘤、提高皮肤的防御能力。
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