【摘 要】
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研究目的X射线修复交叉互补基因3(XRCC3)是RAD51基因家族的重要成员之一,它在DNA双链损伤的同源重组修复和维持染色体稳定中发挥着重要的作用。本文旨在探讨X射线修复交叉互
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研究目的X射线修复交叉互补基因3(XRCC3)是RAD51基因家族的重要成员之一,它在DNA双链损伤的同源重组修复和维持染色体稳定中发挥着重要的作用。本文旨在探讨X射线修复交叉互补蛋白(XRCC3)3对鼻咽癌细胞放疗敏感性的影响。研究方法XRCC3sh RNA干扰序列构建入慢病毒中后感染鼻咽癌CNE2细胞设为实验组(CNE2-sh XRCC3),并设未感染的细胞为对照组(CNE2-shluc);利用平板克隆实验检测细胞的接种存活率,并用线性二次(L-Q)模型曲线的拟合计算不同放疗剂量下鼻咽癌细胞CNE2的存活分数,并计算放疗增敏比(SER);流式细胞仪通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡;并用Western blot检测凋亡蛋白PARP和Caspase-3的表达水平;在免疫荧光染色下观察放疗前后DNA的损伤,比较两组细胞聚焦点的个数。研究结果沉默XRCC3基因能够降低CNE2细胞放疗后的存活分数,放疗增敏比SER=1.232 3;提高射线引起的细胞凋亡比例(23.89±5.63 VS 11.64±3.43,t=3.218,p=0.032 3);并增加细胞凋亡蛋白断裂带(剪切体PARP及剪切体Caspase-3)的产生;增加射线诱导的DNA双链损伤修复聚焦点的形成(72.00±9.00VS 46.00±7.00,t=3.950,p=0.016 8)。研究结论XRCC3可以通过降低鼻咽癌细胞放疗后DNA的损伤及细胞凋亡,从而增加鼻咽鳞癌细胞对放疗的抵抗,XRCC3可能作为一个提高鼻咽癌放疗敏感性的靶向基因。
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