海参多糖的分离纯化、组成鉴定与药理活性研究

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本论文对白底辐肛参、糙海参、黑乳参、沙海参进行了营养组成、多糖分离纯化、多糖结构的研究,并对白底辐肛参多糖进行了抗疲劳、抗凝血作用的研究,论文主要内容如下: 1.白底辐肛参(干品)、糙海参(鲜品)、黑乳参(干品)、沙海参(干品)的蛋白质含量分别为3.88%、72.24%、73.48%、79.41%;脂肪含量分别为0.09%、3.42%、3.58%、3.27%;灰分分别为0.33%、2.94%、3.10%、3.12%;水分分别为95.11%、8.47%、7.62%、5.43%。四种海参中的鲜味氨基酸占蛋白质总量均在31%~33%之间,抗氧化氨基酸均在11%~15%之间,羟脯氨酸均在10%~12%之间。白底辐肛参的Pb含量小于0.01mg/kg,Cu、Mn、Zn等亦不足5mg/kg,而Mg、Ca两种元素含量均高于1500mg/kg。 2.海参多糖最佳提取条件为pH=6.50,木瓜蛋白酶加酶量3000U/g,60℃水浴中作用15h,酶解温度和加酶量都能够显著影响酶解效果。 3.将白底辐肛参多糖、糙海参多糖、黑乳参多糖、沙海参多糖经H<,2>O<,2>氧化法脱色、乙酸钾沉淀法除杂蛋白,以蒸馏水为洗脱液进行柱层析纯化,均得到单一峰。四种海参多糖带电性均呈单一,均为单一成分,分别将其记作MPAM、MPHSJ、MPHNS、MPHAS。 4.MPAM、MPHSJ、MPHNS、MPHAS均为白色粉末状固体,溶于水、稀酸、稀碱、稀盐溶液,易溶于热水,不溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等有机溶剂,其比旋光度分别为-51°、-38°、-59°、-47°。 5.MPAM、MPHSJ、MPHNS、MPHAS的重均分子量(Mw)分别为68592Da、57338Da、76008Da、98748Da,均含有较多的羟基、氨基、羧基、硫酸酯,均为硫酸软骨素E。 6.MPAM、MPHSJ、MPHNS、MPHAS的硫酸根含量分别为30.60%、28.15%、28.08%、27.73%;其所含己糖醛酸均为葡萄糖醛酸,含量分别为17.94%、19.40%、20.71%、19.04%;氨基己糖均为氨基半乳糖,含量分别为15.38%、16.40%、17.75%、14.38%;岩藻糖含量分别为13.56%、11.08%、12.48%、10.12%;多糖中氨基酸总含量分别为7.60%、4.26%、8.35%、2.47%。 7.MPAM的糖苷键以β-型糖苷键为主,多糖中含有醚类基团、酸类的乙酯、微量的乙酰基团和较多的乙酸酯。 8.昆明小鼠负重游泳证明MPAM具有显著的抗疲劳作用;对昆明小鼠和新西兰兔的出血时间和凝血时间测定则显示MPAM抗凝血作用显著。
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