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研究目的:建立了合格的糖尿病大鼠模型后,再行建立右侧胫骨上段骨折模型,术中通过对比性的注射生理盐水、局部注射骨形态发生蛋白-2、局部注射骨形态发生蛋白-2和聚乙烯吡咯啉酮联合制备的注射性rhBMP-2/PVP骨修复液态材料,对比性研究在糖尿病大鼠骨折愈合过程中,液态聚乙烯吡咯啉酮溶剂对骨形态发生蛋白的缓释作用以及高血糖对骨折愈合的影响。研究背景:局部单纯应用BMP-2(bonemorphogenetic protein骨形态发生蛋白)后,在体内很快就被相对应的蛋白酶所降解,同时大量促骨质愈合的相关因子显示在糖尿病患者骨折局部的BMP-2是大幅度的少于健康人群,体外研究显示:rhBMP-2在被液态的PVP(polyethlenepyrolindone聚乙烯吡咯啉酮)载体负载后,获得了比较理想的缓释效果。材料和方法:72只均为2月龄的健康雄性SD大鼠,这些SD大鼠共分为四组,其中把空白的实验对照组设为A组,即非糖尿病实验对照组有18只,剩下的54只通过建立糖尿病模型后设为糖尿病大鼠组(STZ组),再随机配组分为三组,其中B组:糖尿病实验对照模型组18只,C组:rhBMP-2组18只、D组:rhBMP-2/PVP组18只。四组组糖尿病大鼠均在分组成功后进行右胫骨上段骨折手术,成为骨折模型,前后共饲养实验大鼠6周。实验时对rhBMP-2组予以术中腓肠肌肌注rhBMP-2溶液(含rhBMP-2为5mg/Kg),rhBMP-2/PVP组予以术中腓肠肌肌注rhBMP-2/PVP复合缓释溶液(含rhBMP-2为5mg/Kg、PVP100mg/Kg),糖尿病模型组及空白对照组予以手术术中腓肠肌肌注生理盐水(等溶液容量),期间每周进行血糖的监测,并在骨折术后第2周、在第4周、第6周每组分别处死6只大鼠,分别进行右下肢X线片阅片观察评分和新生骨组织的HE染色、组织学染色、用特异性方法测定血清中的OC(ostepcalcin骨钙素)表达、血清中的碱性磷酸酶(alkaline osphatase,ALP)、及光镜下观察骨痂内OB (osteoplast成骨细胞)数量,并描绘BMP-2释放曲线图。结果:骨折术后同一时间, X线片检查结果示:各组局部的骨痂影均逐渐增加,其中A组新生骨痂量均多于B、C组,而均D组少,D组产生骨痂最多、愈合最理想。生化检测指标显示:OC浓度结果显示D组明显高于其他三组,ALP浓度结果显示D组ALP含量显著高于各组。随着骨修复的时间和程度的增大,局部产生的Ca含量也相应的累积升高,含量统计结果显示D>A>C>B。组织学切片结果观察显示: D组骨小梁成熟度和密度均高于其余三组。免疫组化染色后观察示:Ki67指数(%)在术后的第4周达到峰值后成下降趋势,各时间点数据显示:D组峰值高于各组。苏木精-伊红染色光镜下观察显示,C组OB数量明显多于B组,略低于A组,明显低于D组。结论:1. rhBMP-2及rhBMP-2/PVP缓释液均能对糖尿病大鼠骨折处骨愈合起促进作用。2.PVP溶剂对rhBMP-2有较理想的缓释作用, rhBMP-2/PVP复合缓释液对骨折愈合的促进作用优于局部rhBMP-2单纯作用。