论文部分内容阅读
目的： 本研究基于UPLC-MS/MS的代谢组学研究策略，通过对脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞在储存期不同时间点进行代谢组学分析，探讨脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞在常规储存期间的主要代谢特性改变，为脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞的储存和临床使用提供参考。 方法： 采用献血者血浆TG、TC浓度作为标本分组的依据，选择轻脂肪血（B-H）、中度脂肪血（H）、重度脂肪血（V-H）和正常对照全血（C）各10U，制备成去白细胞悬浮红细胞，在制备当天（d0）、d7、d14、d21、d28和 d35分别取样。检测红细胞的形态学、钾离子浓度、钠离子浓度、游离血红蛋白、pH值等质量指标；采用UPLC-MS/MS检测红细胞内代谢物；采用Mann–Whitney U检验分析两组标本糖酵解途径和磷酸戊糖途径代谢物的差异，通过代谢物分析脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞储存期的代谢途径变化。 结果： 1.血常规检测结果：对照组红细胞和3组脂肪血制备的红细胞在储存期间的血液学参数无显著性变化，红细胞计数、血红蛋白和MCH无趋势性变化，红细胞储存过程中 HCT和 MCV下降，MCHC和RDWR呈上升趋势，与 d0比较，各时间点的变化均无统计学意义(p>0.05)。血液学参数变化不明显(P＞0.05)。 2.生化指标检测结果：与对照组比较，K+浓度H组和V-H组第7天起增高均有统计学意义； FHb浓度，在H组第7天和V-H组第0天起增高均有统计学意义。各组红细胞之间Na+浓度、pH值变化无统计学意义(P＞0.05)。 3.代谢组学分析结果：D0实验组红细胞内代谢物葡萄糖、腺嘌呤、丙酮酸、GSH、GSSG和烟碱酰胺均高于对照组（p<0.05）。D14实验组红细胞中葡萄糖、丙酮酸和GSH低于对照组（p<0.05），腺嘌呤、烟碱酰胺和GSSG高于对照组。D35实验组红细胞中葡萄糖低于对照组（p<0.05），腺嘌呤、烟碱酰胺高于对照组（p<0.05），两组之间的丙酮酸、GSSG和GSH差异无统计学意义（p>0.05）。 结论： 在储存条件下，葡萄糖分解中间代谢物通过戊糖磷酸途径(PPP)来增加NADPH的产生，以维持GSH的还原状态。储存条件下，氧化环境和氧化应激导致脂肪血制备的红细胞储存期代谢特性发生变化，与正常红细胞相比，脂肪血红细胞储存期内糖酵解途径减弱，磷酸戊糖途径增强。