目的:研究激活蛋白(activator protein-1,AP-1)在全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)成脂分化信号通路中的调控机制。方法:采用SD大鼠原代BMSCs,体外分离,培养和成脂分化诱导。油红O染色鉴定细胞成脂分化中脂滴形成情况。成脂诱导在第1天,第5天,第9天的同一时间点添加浓度为1μmol/L ATRA,持续处理24小时(即成脂分化诱导第2天,第6天,第10天),收取细胞样本。应用荧光实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测脂肪细胞形成相关基因脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein,FABP)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸转运蛋白(CD36)、脂滴包被蛋白(Perilipin)、过氧化物酶体增殖激活受体-γ2(peroxisome proliferator-activated receptor gamma-2,PPARγ2)以及AP-1家族各成员(Fosl1,Fosl2,c-Fos,Fos B,c-Jun,JunB,JunD)基因表达水平。Western blot检测蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测相关蛋白(RARγ,Fosl1)与PPARγ2基因是否存在相互作用。结果:(1)油红O染色结果显示,ATRA处理组中细胞形成的脂滴数量明显减少,且油红染料吸光度OD值明显下降。(2)BMSCs成脂诱导12天后,RT-PCR结果显示,与对照组相比,1μmol/L ATRA处理组脂肪细胞形成相关基因FABP,LPL,CD36,Perilipin,PPARγ2表达均显著降低(PFABP<0.05,PLPL<0.001,PCD36<0.001,PPerilipin<0.05),P<0.05差异具有统计学意义。(3)RT-PCR检测AP-1家族各转录因子表达,Fosl1在ATRA处理组成脂诱导第2天,第6天,第10天mRNA表达水平均显著升高(P第2天<0.01,P第6天<0.01,P第10天<0.001)。Westren blot结果显示,ATRA处理组Fosl1蛋白表达显著升高,而PPARγ2蛋白表达明显下降。(4)ChIP-qPCR结果表明,Fosl1蛋白可结合在PPARγ2基因启动子区域,而RARγ蛋白未直接结合在PPARγ2基因启动子上。结论:ATRA可抑制BMSCs成脂分化及脂质代谢相关基因的表达,可能通过上调Fosl1直接结合PPARγ2基因启动子区域下调其表达有关。