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本试验采用奶牛瘤胃体外发酵的技术方法初步研究并比较了三种不同种类的酵母菌菌种(产朊假丝酵母、热带假丝酵母、酿酒酵母)以及两种不同种类的芽孢杆菌菌种(地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌)对于以玉米秸秆和水稻秸秆为发酵底物的体外发酵的GP、LE产气模型相关参数、CH4产量、DMD、NDFD、pH值、NH3-N、VFA等瘤胃发酵指标的影响。试验所得结果如下:
(1)添加产朊假丝酵母整体上增加了玉米秸秆体外发酵的产气量,促进了体外发酵初期玉米秸秆的降解,从而加快了体外发酵初期气体的生成。三种酵母茵均显著地增大了玉米秸秆体外发酵的CH4产量(P<0.05),但随着添加水平的升高其CH4产量有先增加后减少的趋势。当水稻秸秆作为发酵底物时,酿酒酵母的0.25×107cfu添加水平显著地增加了Vf值(P<0.05),产朊假丝酵母与热带假丝酵母均能够加快发酵初期水稻秸秆的降解以及气体的生成,并显著地增加体外发酵的CH4产量(P<0.05)。
(2)在玉米秸秆作为体外发酵底物时,虽然未达到显著性水平(P>0.05),产朊假丝酵母的添加总体上会导致DMD及NDFD的略微降低。而酿酒酵母及热带假丝酵母则分别有显著提高玉米秸秆的DMD及NDFD的作用(P<0.05)。在以水稻秸秆作为底物的体外发酵当中,产朊假丝酵母与热带假丝酵母则分别显著性地降低了水稻秸秆的DMD及NDFD(P<0.05)。酿酒酵母处理组中各个添加水平间的差异虽然不显著(P>0.05),但是水稻秸秆的DMD与NDFD整体上随着添加水平的升高而逐渐增大。
(3)以玉米秸秆作为发酵底物时,产朊假丝酵母与热带假丝酵母均显著地降低了体外发酵瘤胃液的pH值(P<0.05),而添加酿酒酵母则显著地提高了体外发酵瘤胃液的pH值(P<0.05)。在水稻秸秆作为发酵底物的体外发酵中,添加三种酵母菌均能显著地降低体外发酵瘤胃液的pH值(P<0.05)。
(4)在玉米秸秆作为发酵底物进行体外发酵时,产朊假丝酵母0.50×107cfu添加水平时显著地降低了体外发酵液中的NH3-N浓度(P<0.05),而酿酒酵母与热带假丝酵母则均线性地显著增加了NH3-N浓度(P<0.05)。在以水稻秸秆为底物的体外发酵中,产朊假丝酵母的0.25×107cfu添加水平显著地降低了发酵液的 NH3-N浓度(P<0.05),热带假丝酵母线性地升高了NH3-N浓度(P<0.05)。
(5)在以玉米秸秆为底物的体外发酵中,添加产朊假丝酵母总体上显著地降低了玉米秸秆体外发酵液中的乙丙比以及戊酸浓度(P<0.05),并且使总VFA浓度略有降低但差异未达到显著水平(P>0.05)。酿酒酵母能够以线性的形式显著地增加丙酸与异戊酸的浓度(P<0.05),其0.75×107cfu添加水平显著地增加了总VFA(P<0.05)。热带假丝酵母整体上显著降低了乙丙比(P<0.05)。
在水稻秸秆作为发酵底物的体外发酵中,产朊假丝酵母的添加整体上显著地降低了体外发酵液中的戊酸浓度以及乙丙比(P<0.05),而其0.75×107cfu添加水平显著地降低了总VFA的浓度(P<0.05)。酿酒酵母对于绝大部分VFA的浓度、乙丙比、以及总VFA均无显著性影响(P>0.05)。热带假丝酵母0.50×107cfu添加水平显著地降低了乙丙比(P<0.05),但对总VFA无显著影响(P>0.05)。
(6)地衣芽孢杆菌使玉米秸秆体外发酵产气参数Vf值略有增加但差异并不显著(P>0.05),其添加对玉米秸秆的FRD0值及t0.5值亦无显著性效应(P>0.05)。地衣芽孢杆菌0.25×107cfu及0.50×107cfu两个添加水平则显著地增加了水稻秸秆体外发酵的Vf值(P<0.05),并线性地增加了水稻秸秆的FRD0值(P<0.05),并总体上使得水稻秸秆体外发酵产气的t0.5值稍有减小(P>0.05)。枯草芽孢杆菌0.25×107cfu添加水平均显著地提高了玉米秸秆及水稻秸秆体外发酵的最大理论产气量Vf(P<0.05),其0.25×107cfu添加水平显著地增大了玉米秸秆体外发酵产气的FRD0值(P<0.05),而其0.50×107cfu添加水平既显著地增大了水稻秸秆体外发酵产气的FRD0值(P<0.05),又显著地减小了t0.5值(P<0.05)。
(7)在分别以玉米秸秆及水稻秸秆为底物的体外发酵中,地衣芽孢杆菌的0.75×107cfu添加水平均使CH4产量相对于0添加水平均略有降低,但差异均不显著(P>0.05)。枯草芽孢杆菌的0.75×107cfu添加水平显著地减少了玉米秸秆体外发酵的CH4产量(P<0.05),并使水稻秸秆的CH4产量相对于0添加水平均稍有减少但差异不显著(P>0.05)。
(8)在以玉米秸秆为底物的体外发酵中,地衣芽孢杆菌各添加水平对于玉米秸秆体外发酵的DMD及NDFD均无显著性影响(P>0.05)。枯草芽孢杆菌0.25×107cfu添加水平显著地降低了玉米秸秆的DMD(P<0.05),而0.25×107cfu、0.50×107cfu、以及0.75×107cfu三个添加水平相对于0添加水平而言,均对NDFD无显著性效应(P>0.05)。在以水稻秸秆作为发酵底物时,地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的添加整体上均使得水稻秸秆体外发酵的DMD及NDFD略有降低,但差异均不显著(P>0.05)。
(9)以玉米秸秆作为发酵底物时,地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的添加均呈现出极显著的一次线性效应(P<0.01),显著地降低了体外发酵液的pH值(P<0.05)。而在水稻秸秆的体外发酵中,地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的各个添加水平之间则均存在有极显著的三次效应(P<0.01),0.25×107cfu、0.50×107cfu、以及0.75×107cfu三个添加水平均显著地降低了发酵液的pH值(P<0.05)。
(10)在以玉米秸秆为发酵底物时,添加地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌均整体上使得NH3-N浓度稍有下降,但差异均不显著(P>0.05)。而在以水稻秸秆作为发酵底物时,添加地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌均整体上使得NH3-N浓度稍有上升,但差异同样不显著(P>0.05)。
(11)在以玉米秸秆作为底物的体外发酵中,添加地衣芽孢杆菌线性地增加了乙酸浓度、乙丙比、以及总VFA浓度,但对于各种VFA浓度、乙丙比、以及总VFA浓度均未产生显著性效应(P>0.05)。枯草芽孢杆菌的添加显著地降低了各种VFA的浓度以及总VFA浓度(P<0.05),并且显著地升高了乙丙比(P<0.05)。而在以水稻秸秆作为底物的体外发酵之中,地衣芽孢杆菌的添加虽然线性地增大了发酵液中异戊酸与戊酸的浓度,但对于各种VFA浓度、乙丙比、以及总VFA浓度均未产生显著性影响(P>0.05)。枯草芽孢杆菌的添加同样显著地降低了各种VFA的浓度以及总VFA浓度(P<0.05),并且显著地升高了乙丙比(P<0.05)。
综合以上结论并在整体上进行比较可以得出,添加酿酒酵母的效果要优于产朊假丝酵母及热带假丝酵母,而添加地衣芽孢杆菌的效果则要好于枯草芽孢杆菌,本试验中酿酒酵母与地衣芽孢杆菌的最佳添加水平均为0.75×107cfu。添加酿酒酵母与地衣芽孢杆菌对于改善瘤胃发酵过程、促进瘤胃微生物的物质代谢具有一定的积极作用。然而某些效应之所以未达到显著水平(P>0.05),可能是由于其添加水平不够高,亦可能是由本试验所选用菌株的自身特异性所导致的。因此,其中具体的原因以及两种饲用微生物的实际最佳添加水平需要开展更进一步的试验研究以探索论证。