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目的：晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的一线治疗方法之一为表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI），现已开发至第三代。AZD9291(osimertinib;Tagrisso)是目前唯一通过FDA认证的三代抑制剂，主要应用于携带T790M突变的NSCLC患者。虽然早期疗效显著，但大多数患者在9-13月后出现耐药。现已阐明多种耐药原因，但并不能完全解释及是否存在其他可能的耐药机制。有研究表明，STAT3蛋白在多种肿瘤组织或细胞中高表达，STAT3可能参与了肿瘤的形成与发展。本实验探讨AZD9291作用于T790M突变的H1975肺癌细胞后细胞内主要信号通路蛋白变化，以及抑制STAT3通路激活能否增强AZD9291作用及其机制。 方法： 1.不同浓度AZD9291作用于肺癌细胞H1975后，应用WESTERN Blot检测细胞内主要信号通路蛋白变化，磷酸化及非磷酸化STAT3，ERK，AKT蛋白的表达水平。 2.使用MTT法检测AZD9291与STAT3抑制剂对细胞增殖作用的影响。分别予单药AZD9291，单药STAT3抑制剂及两药联合作用于H1975，了解增殖抑制作用，计算AZD9291与STAT3抑制剂联合给药时的联合指数(CI)，评价两药间的相互作用。 3.流式细胞术检测使用预先测得的IC50浓度药物AZD9291组(20nmol/L)、STAT3抑制剂组(96μmol/L)、AZD9291+STAT3抑制剂组处理后的H1975细胞凋亡变化。应用FCM（Flow Cytometry，流式细胞术），Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测单药及联合作用对细胞凋亡及细胞周期的影响。 4.Western blot法检测AZD9291联合STAT3抑制剂后磷酸化及非磷酸化STAT3蛋白表达变化情况。 结果： 1.Western blot法显示AZD9291作用于H1975后，ERK及AKT信号通路持续封阻，p-ERK,p-AKT表达明显降低，而p-STAT3蛋白表达却异常增高。 2.MTT法表明,与单药作用相比，可显著抑制H1975细胞的增殖，抑制作用强于AZD9291单药组及STAT3单药组（P＜0.05），表现为协同作用（CI值＜1）。 3.双药联合时相较于单药组显示出更强的诱导凋亡的作用及使细胞周期明显阻滞于G0/G1期。 4.Western blot法显示两药联合组与对照组或单个药物组相比对p-STAT3蛋白明显抑制作用。 结论：AZD9291作用与H1975后可以导致STAT3信号通路激活，p-STAT3蛋白增高。AZD9291和STAT3抑制剂联合用药对H1975细胞的增殖有明显抑制作用并可以促进其凋亡的发生，具有协同作用。