【摘 要】
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奶牛配种后,尽早地判断其妊娠与否,以便对已妊娠者加强饲养管理,对未妊娠者找出原因,及时补配或进行必要的处理。这对缩短奶牛产犊间隔,提高其繁殖力具有重要意义。本试验分
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奶牛配种后,尽早地判断其妊娠与否,以便对已妊娠者加强饲养管理,对未妊娠者找出原因,及时补配或进行必要的处理。这对缩短奶牛产犊间隔,提高其繁殖力具有重要意义。本试验分别运用了半定量PCR技术和mRNA差异显示技术,研究了以奶牛血液中PAG基因的表达量为依据的早期妊娠诊断方法以及空怀牛和妊娠牛血液相关基因表达的差异,从分子水平上了解早期妊娠诊断过程中基因表达的变化规律,以期为哺乳动物早期妊娠诊断的新方法研究提供参考。结果如下:空怀牛和已妊娠21天的妊娠牛血液中PAG基因均有表达,妊娠牛PAG基因表达量略高于空怀牛,但是两者差异不显著,t=2.3695<t0.05(34),即P>0.05。这也就说明配种后21天奶牛血液中PAG基因的表达量不能被作为妊娠早期诊断的依据。在妊娠母牛血液中共筛选到了6条分别特异表达的片段,经过测序及对比分析,表明有3条带与已知的功能基因或调控基因相似,其余条带为未知功能基因或无相似基因。其中:S1序列与转化因子TGF-β2具有较高的同源性(98%),TGF-β2对牛滋养层和子宫内膜上皮有促进增生的作用,而对上皮细胞生长和倾入滋养层有抑制作用;TGF-β2还对转型变异的人子宫内膜和家畜上皮有促增长作用。S4序列与集刺落因子1有较高的同源性(97%),CSF能刺激早期胎盘生长,还能抑制NK细胞的功能,减少流产的发生。S5序列与胰岛素生长因子具有较高的同源性(98%),IGF主要通过膜受体起作用,可刺激胎盘促乳素的释放,调节其它类固醇激素的合成与分泌。IGFs与胚泡植入、胎盘形成和功能、胎儿生长发育有关,具有促进滋养细胞浸润、利于胚胎着床等作用;参与了早期妊娠多个环节的调节,是胚胎发育的重要影响因子。
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