多重PCR检测鲍曼不动杆菌6种耐药基因位点及指导临床用药的研究

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目的:鲍曼不动杆菌(Aba,Acinetobacter baumannii),是临床常见的条件致病菌,随着临床样本中检出率及耐药率的上升,其对卫生健康事业带来很大威胁。本文旨在研究和验证一种新的检测方法——多重PCR,用于监测Aba的感染和耐药基因流行情况,并指导临床用药。方法:通过调查研究大量与Aba相关的耐药基因情况,以及我科室之前对82例Aba 14种耐药基因的初步筛查和实验条件的摸索,挑选出耐药机制明确、临床流行范围广的耐药基因。并综合考虑引物TM应相近、目的片段长度易区分的多重PCR实验基础,经大量预实验后,最终挑选出6种目的耐药基因,设计为引物复合物,用于多重PCR。随后,挑选我科室47株不同患者的Aba菌株验证多重PCR引物复合物灵敏性、稳定性和检出率,并与药敏试验结果进行比对分析。结果:多重PCR技术可同时检出多耐药Aba的blaOXA-23,Car O,aac(6′)-I,blaOXA-51,ant(3″)-I和intI1 6种耐药基因;且与单一PCR检测耐药基因结果一致,条带显示清晰、特异,经测序验证正确率100%。多重PCR检出的耐药基因与相应抗生素药敏结果关联密切,blaOXA-23阳性菌株中,IPM、MEM均耐药比率达98%;aac(6′)-I和ant(3″)-I双阳性的菌株中,AN与GM都耐药率达93.5%。结论:采用设计的含6个耐药基因的引物复合物,对菌株进行多重PCR检测,可省时、高效地检测出Aba的耐药基因,推测耐药类型,指导临床用药。
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