西瓜枯萎病的防治与抗病相关基因的表达分析

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西瓜枯萎病是我国瓜类作物上广泛分布的重要病害之一。它是一种土壤传播的积年流行病害,主要危害植物的维管束。引起西瓜枯萎病发生的病原为Fusarium oxysporum fsp.niveum,有四个生理小种,生理小种0、1、2、3。目前关于西瓜枯萎病的致病机理的解释主要有两个方面,西瓜枯萎病菌可以侵入西瓜根部,在维管束系统中定殖并扩展,并产生激素、酶类和毒素等物质,这些物质都会给植物造成伤害。另一方面,西瓜植株的木质部导管中可以产生侵填体封闭导管,限制病原菌的继续扩展。目前针对西瓜枯萎病菌的生防菌,主要有木霉属真菌、丛枝菌根真菌、非致病尖孢镰刀、芽孢杆菌和内生真菌等。其中,枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属中具有巨大潜力的菌种之一,但在生产上还没有大规模使用。在西瓜抗病机理研究方面,由于受到西瓜基因组序列信息的限制,所以目前研究进展比较缓慢。本文研究了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对西瓜枯萎病的防治效果,并与施用内生真菌Piriformospora indica及其相似种Sebacina vermifera后接种病菌的西瓜进行防治效果的比较。结果表明,枯草芽孢杆菌可湿性粉剂可以有效防治西瓜枯萎病,P. indica及其近似种S.vermifera在防治西瓜枯萎病方面也表现出一定的潜力:不同方法使用枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,防治效果略有不同,其中灌根法防治效果最佳。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂和两种内生真菌对西瓜本身的生长发育也有促进作用,结果表明枯草芽孢杆菌可湿性粉剂、内生真菌P. indica及其相似种S vermifera对西瓜地上部分和地下部分均表现出显著的促进作用,灌根P. indica的效果最显著;不同方法使用枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,促进生长发育效果有所不同,穴施法效果略佳。为了深入的探究西瓜抗病机理,本实验克隆了西瓜抗病相关基因ClNPR1、 ClPR1a、ClACOs和ClACSs的全长cDNA并对西瓜抗病相关基因ClNPR1、 ClPR1a、ClPR3、CIERF1、ClERF4、CIERF5和ClACO1在不同生长时期、不同生长部位、喷施植物激素及接种西瓜枯萎病菌处理下的基因表达情况进行了分析。结果表明,在西瓜4-6叶期,西瓜茎部组织中ClERF1表达上调显著;在未诱导情况下,西瓜抗病基因在西瓜植株内表达量较少;喷施植物激素SA、JA、ACC及接种西瓜枯萎病菌后,西瓜抗病基因存在不同程度的上调表达。综上所述,枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对西瓜枯萎病有显著的防治效果,内生真菌P. indica及其近似种S. vermifera具有潜在的生防价值。本研究为使用枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治西瓜枯萎病提供了理论依据,也为使用内生真菌防治西瓜枯萎病提供了新思路。此外,对西瓜抗病基因的表达分析为研究西瓜枯萎病的分子抗病机制提供了依据。
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