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乳腺癌发病率呈逐年上升趋势,是全球女性最常见的恶性疾病之一。致死原因大多是原发肿瘤细胞经血道或淋巴道转移至远处器官。其发生发展、浸润转移的分子机制尚未完全阐明。S100蛋白家族是一类脊椎动物中的EF-手相钙结合蛋白,至少由20种成员组成。Psoriasin (S100A7)是S100蛋白家族的一员,在细胞中参与调节蛋白磷酸化、细胞骨架和转录因子的组成以及细胞增生和分化。参与神经细胞分化,星形细胞增殖,炎性细胞趋化等。S100A7主要定位于表皮角质形成细胞。有研究表明S100A7在多种肿瘤中表达,包括皮肤的鳞状细胞癌、肺癌、宫颈癌和膀胱癌及乳腺癌等。且S100A7持续表达在浸润癌中,与预后不良有关。Leygue等在研究Psoriasin(S 100A7)mRNA的表达水平时发现,在正常、良性和不典型增生的乳腺导管中几乎不表达,而在导管内原位癌(DCIS)的导管上皮细胞中高度表达。目前研究S100A7在肺癌脑转移组织中高表达提示S100A7与肿瘤转移有关,小鼠模型实验显示S100A7与肿瘤的侵袭和血管形成有关。最近Vikram Paruchuri等研究表明S100A7在EGF的诱导下参与激活EGFR信号通路。CXCR4是一个跨膜的G蛋白偶联受体,是CXCL12的受体,属于CXC家族趋化因子,两者具有高度的特异性和亲和力。已有的研究表明,CXCL12/CXCR4具有介导免疫及炎症反应,调控造血干细胞迁移及归巢,参与胚胎发育过程；此外,近年研究还发现CXCR4在卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌等多种肿瘤中高表达,并在肿瘤侵袭、迁移中发挥重要作用。参与激活PI-3K(磷脂酰肌醇-3激酶)、MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)和NF-K B信号通路。有文献报道SHIP2(磷酸肌醇磷酸酯酶)可以通过EGFR-AKT通路上调CXCR4的表达和细胞的迁移。目前S100A7与CXCR4之间关系尚不清。我们将采用免疫组化、转染、Western blot、Transwell、划痕实验等方法初步探讨S100A7与CXCR4的表达情况及相关性,S100A7与ER及HER2、血管密度的关系；CXCR4与ER及HER2、血管密度的关系。S100A7与CXCR4如何调控,和对乳腺癌细胞生物学行为的影响。材料与方法1.应用免疫组化方法检测S100A7与CXCR4及CD34在正常乳腺和226例乳腺癌组织中的表达及相关性。2.用Western blot方法检测乳腺癌稳转细胞系S100A7+MDA-MB-231和Vector +MDA-MB-231中CXCR4和EGFR／PI3K通路中蛋白的变化。3.细胞划痕实验和Transwell实验检测在EGF的诱导下S100A7对细胞功能的影响。4.应用SPSS16.0统计分析软件,x2检验,相关性采用spearman等级相关分析;对计量资料,所得数据用均数±标准差(x±s)表示,两样本均数比较先进行方差齐性检验,方差齐则采用成组设计资料两样本均数比较的t检验；P<0.05为有统计学意义。结果一、免疫组化方法检测S100A7与CXCR4及CD34在乳腺癌中的表达情况及相关性1、S100A7在20例正常乳腺组织中低表达或几乎不表达,(如图1、2)；CXCR4在20例正常乳腺组织中不表达。(如图1、2)。2、S100A7在乳腺浸润性导管癌中细胞浆与细胞核表达。CXCR4在细胞浆和细胞核均有表达。(如图1、2)3、S100A7在ER(-)组中阳性表达率明显高于ER(+)组中的阳性表达率。S100A7与ER负相关。在ER(-)组中,ER(-)PR(-)HER2(+)组比ER(-)PR(-)HER2(-)组的阳性表达率高,阳性率分别为62.2%和42.5%。在ER(+)PR(+)HER2(+)组的阳性率高于ER(+)PR(+)HER2(-)的阳性率,阳性率分别为27.2%和15.6%。S100A7与HER2正相关。4、CXCR4在ER(-)组中阳性表达率略高于ER(+)组中的阳性表达率。但无统计学意义。在ER(-)组中,ER(-)PR(-)HER2(+)组比ER(-)PR(-)HER2(-)组的阳性表达率高,阳性率分别为79.2%和61.1%。CXCR4在ER(+)PR(+)HER2(+)中的阳性率高于ER(+)PR(+)HER2(-)组的阳性率,阳性率分别为78.2%和61%。CXCR4与HER2正相关。5、CXCR4的表达与S100A7表达存在正相关性。(r=0.433,p<0.05)6、S100A7与CXCR4在乳腺癌中均与血管密度成正相关。二、Western blot方法检测乳腺癌细胞EGFR／PI3K通路蛋白的情况1、S100A7稳转细胞中CXCR4表达高于对照组,提示S100A7上调CXCR4的表达2、EGF诱导S100A7激活EGFR／PI3K信号通路：通路下游信号分子磷酸化水平Phospho-EGFR和Phospho-IRS-1表达水平明显比对照组中表达增强。三、对乳腺癌细胞生物学功能的影响1、细胞划痕实验显示在EGF诱导下S100A7增强促进细胞迁移。2、Transwell实验显示在EGF诱导下S100A7增强促进细胞迁移。结论1、在乳腺浸润性导管癌中S100A7与ER、PR负相关；S100A7与HER2正相关；2、CXCR4与HER2正相关；3、CXCR4与100A7在乳腺癌中成正相关。S100A7与CXCR4均与血管密度成正相关；提示S100A7与CXCR4在乳腺癌的发生发展中起重要的作用。4、在乳腺癌细胞系中,在EGF的诱导下,S100A7能通过EGFR／PI3K信号通路上调CXCR4的表达,从而增强促进乳腺癌细胞的迁移。