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目的:通过检测皮瓣重建阴囊后睾丸生精细胞凋亡及p53蛋白表达变化情况,探讨皮瓣重建阴囊对新西兰大白兔生殖功能的影响。
方法:以育龄期新西兰大白兔作为实验动物,随机分为实验组(皮瓣重建阴囊组)48只、对照组18只,建模后取兔睾丸组织活检,应用原位末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡和免疫组化法(SABC法)检测p53蛋白表达情况;建模前、配对前用放免检测血清睾酮,8周末各组分别对未取睾丸活检的12只雄性兔与雌兔配对喂养,观察生育情况。
结果:血清睾酮检测结果:配对前血清睾酮浓度与模型建立前的血清睾酮浓度相比较无统计学意义(P>0.05)。凋亡检测结果:实验组在重建阴囊后3~8周内随着时间延长凋亡指数逐渐增加,其凋亡指数明显高于对照组(P<0.05)。p53检测结果:正常对照组睾丸生精小管各级生精细胞未见p53蛋白表达;实验组在重建阴囊后8周末时p53蛋白的阳性率较3周末时的阳性率明显增高,两时段之间有比较差异有统计学意义(P<0.05);皮瓣重建阴囊后8周末时p53蛋白的阳性率比对照组高,两者之间差异有统计学意义(P<0.05);皮瓣重建阴囊后3周末时p53蛋白的阳性率比对照组高,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。配对结果:对照组配对后对应母兔受孕生育,平均生育数为6.0只;实验组配对后对应母兔均未受孕,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论(1)皮瓣重建阴囊导致的新西兰大白兔生殖功能障碍主要是由于生精细胞的过度凋亡所致;(2)皮瓣重建阴囊后新西兰大白兔睾丸生精细胞凋亡增加是p53表达升高所致。