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研究背景动脉粥样硬化性心脏血管疾病（atherosclerotic cardiovascular disease,ASCVD）目前是国内外主要的致死疾病。目前,ASCVD的一级和二级预防策略均以寻求纠正异常的血清胆固醇水平为主,但研究证实,即使通过积极的强化降脂治疗使低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）降到很低的水平,主要心血管事件（心血管死亡、非致命性心肌梗死、不稳定心绞痛再住院、冠脉血运重建和非致命性缺血性脑卒中）的发生率仅下降约30%。大量研究表明,动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是一种炎症性疾病,炎症反应伴随AS发生发展的整个过程,临床研究证明抗炎治疗可获得明显的临床效果,减少心血管事件。巨噬细胞是AS发生发展进程中炎症反应和泡沫细胞形成的核心部位,因此,寻找可以影响巨噬细胞炎症反应的新靶点,阐明其具体作用机制,可能是防治AS的新思路,并可为临床治疗ASCVD开辟新途径。脯氨酸/丝氨酸丰富的卷曲螺旋蛋白（proline/serine-rich coiled-coil protein 1,PSRC1）由细胞PSRC1基因编码,是一种微管结合蛋白（microtubuleassociated proteins）,为正常真核细胞有丝分裂进程的必要分子。有研究显示,PSRC1的基因多态性与AS的发生相关。也有研究发现,PSRC1基因表达水平与CAD的发生率呈负相关。我们前期研究在ApoE-/-小鼠上过表达PSRC1基因后,发现PSRC1可以抑制炎症反应,并且进一步抑制AS的发生发展。国内外文献和我们前期研究均证实,PSRC1基因与AS的发生相关,但其确切的作用机制仍尚未阐明。研究目的本研究拟在体外细胞水平筛选出PSRC1的结合蛋白,进而鉴定该蛋白ANXA2与PSRC1的相互作用情况;在体外细胞和体内动物水平证明ANXA2与PSRC1相互作用可减少ANXA2释放;并探讨ANXA2与PSRC1相互作用对AS发生发展的的作用及可能的机制,为AS治疗提供新的靶点。研究方法细胞水平:分为Ad-PSRC1+oxLDL组和Ad-GFP+oxLDL组,用非标记定量蛋白质组学研究鉴定在氧化低密度脂蛋白（oxLDL）刺激下与PSRC1结合的蛋白;免疫共沉淀（Co-IP）对蛋白质谱结果进行验证,用免疫荧光检测PSRC1和ANXA2的细胞内共定位情况;另在Ctrl组,oxLDL组,Ad-GFP+oxLDL组和Ad-PSRC1+oxLDL组中,用ELISA检测四组上清中ANXA2水平,确定过表达PSRC1后及oxLDL刺激对培养上清中ANXA2水平的影响;在RAW264.7细胞中转染Ad-GFP或Ad-shANXA2,RT-PCR检测细胞内ANXA2的mRNA表达情况,鉴定Ad-shANXA2的敲低效果。动物水平:使用Ad-shANXA2尾静脉注射,构建ANXA2敲低的ApoE-/-小鼠模型,试验分为四组,即普食+Ad-GFP组（n=6）,普食+Ad-shANXA2组（n=6）,高脂+Ad-GFP组（n=6）和高脂+Ad-shANXA2组（n=6）,检测小鼠体重、血脂四项及血糖水平,ELISA试验检测小鼠血清中白细胞介素-1 β（IL-1 β）及白细胞介素-6（IL-6）的水平,分离小鼠主动脉大体及主动脉根部切片进行油红O染色观察动脉粥样硬化（AS）面积、HE染色观察AS脂质斑块脂质含量、Masson染色观察斑块内胶原纤维含量及斑块稳定性。研究结果蛋白质组学发现,PSRC1与ANXA2有结合,而在oxLDL刺激下PSRC1与ANXA2的结合显著增加,并且具有特异性;免疫荧光也发现PSRC1和ANXA2在细胞内存在共定位现象;shANXA2转染RAW264.7细胞后,ANXA2的水平显著下降（P<0.05）;RAW264.7巨噬细胞过表达PSRC1后细胞培养上清ANXA2显著减少（P<0.05）;降低ANXA2表达后血清中IL-1 β和IL-6的分泌显著降低（P<0.05）;抑制小鼠ANXA2表达后可减轻体重、改善血脂水平,同时小鼠主动脉大体及主动脉根部斑块面积、脂质核心面积及斑块内巨噬细胞浸润均显著减少（P<0.05）,主动脉斑块的纤维含量和平滑肌数量增加,斑块稳定性增加。研究结论综上所述,我们的研究证实,巨噬细胞过表达PSRC1能够减缓动脉粥样硬化的进展,其机制可能和PSRC1与ANXA2的结合增加,抑制ANXA2释放至胞外,并抑制炎症因子IL-1β和IL-6的释放有关。