背景：糖尿病(diabetes mellitus,DM)大血管病变包括心、脑和周围大血管病变,以动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)为病理基础,主要累及主动脉、冠状动脉、脑动脉、颈动脉、肾动脉及下肢动脉等。目前,大血管发生病变是糖尿病患者致残和死亡的主要原因。因此,针对大血管病变寻求有效的治疗策略已经成为糖尿病研究的重要课题之一。中医学认为糖尿病大血管并发症主要属于“痰浊”、“血瘀”等范畴,痰瘀互结、沉积血脉为其主要病理特征。目前,对于该病的中医辨证分型方面研究较少,缺乏客观指标等。视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein4RBP4)为分泌型视黄醇结合蛋白,主要由肝细胞和脂肪细胞分泌。众多研究表明,RBP4与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗、高血压、脂质代谢异常等密切相关,并可能为T2DM大血管病的独立危险因素之一,但对于其与T2DM大血管病变患者中医病症相关性方面尚无研究报道。目前临床上对于T2DM大血管病变的治疗主要以降糖、调脂为主,但其致残、致死率仍居高不下。芹菜素(apigenin)是一种广泛存在的黄酮类化合物,它具有神经保护、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗炎等作用。目前,芹菜素对动脉粥样硬化的干预作用尚无相关研究报道。本课题通过研究T2DM大血管病变患者血清RBP4表达水平,并分析其与中医病症的相关性,为T2DM大血管病变的临床辨证论治提供微观的实验依据；通过研究中药单体芹菜素对体外的动脉粥样硬化细胞模型的干预作用,进一步探讨芹菜素对AS的影响及机制,为T2DM大血管病变探索新的治疗途径。目的：观察T2DM大血管病变患者血清RBP4的水平,分析其与中医病证的相关性；用不同浓度葡萄糖培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),在体外模拟糖尿病患者高血糖环境下血管内皮细胞的状态,并用芹菜素进行干预,观察芹菜素对高糖环境下人脐静脉内皮细胞凋亡情况,及其表达单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、一氧化氮(NO)、活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)蛋白表达量的影响,探讨芹菜素对高糖致动脉粥样硬化的影响及机制。方法：1临床研究统计60例2型糖尿病大血管并发症患者中医辨证分型的特征,并用ELISA法检测患者血清RBP4的水平,分析RBP4与中医病证的相关性,希望为2型糖尿病大血管并发症的辨证论治提供实验依据。2细胞实验将人脐静脉内皮细胞用含有10%胎牛血清、1%双抗(青霉素、链霉素)的DMEM培养基进行培养,并分为5组：①对照组：HUVEC在葡萄糖浓度为5.5mmol/1的DMEM培养液中培养24小时；②高糖组：]1UVEC在葡萄糖浓度为25mmol/1的DMEM培养液中培养24小时；③高糖+10μmol/L芹菜素组：HUVEC在葡萄糖浓度为25mmol/1,芹菜素浓度为10μmol/L的DMEM培养液中培养24小时；④高糖+20μmol/L芹菜素组：HUVEC在葡萄糖浓度为25mmol/1,芹菜素浓度为20μmol/1的DMEM培养液中培养24小时；⑤高糖-40μmol/L芹菜素组：HUVEC在葡萄糖浓度为25mmol/1,芹菜素浓度为40μmol/L的DMEM培养液中培养24小时：采用cck8法观察各组间HUVEC的凋亡情况,采用ELISA法测定HUVEC细胞上清液中ROS、SOD、NO、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的含量,并用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测HUVEC磷酸化P38MAPK蛋白表达量,采用SPSS17.0统计软件对实验数据进行分析。结果：1临床研究1、T2DM大血管病变患者重指数均有增加,其中气阴两虚组及阴阳两虚组增加最明显(P<0.01)。各组间病程的变化亦符合BMI的变化趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。2、T2DM大血管病变各组患者血清RBP4水平均显著升高(P<0.01),与阴虚热盛组患者向比较,其中气阴两虚组及阴阳两虚组患者血清RBP4水平较阴虚热盛组患者有所升高(P<0.05)。气阴两虚组及阴阳两虚组患者之间血清RBP4水平差异无统计学意义(P>0.05)。2细胞实验1、与对照组相比较,高浓度的葡萄糖可以抑(?)(?)HUVEC的增殖,芹菜素的干预可以明显改善高浓度葡萄糖对HUVEC的损伤,并呈剂量依赖性(P<0.01)。2、在高糖环境下,HUVEC上清液中ICAM-1、VCAM-1及MCP-1的表达量较对照组升高,而在芹菜素干预组中,上述炎症因子的表达量明显下降,并呈剂量依赖性。3、在高糖环境下,HUVEC上清液中ROS含量较对照组明显升高,SOD及NO则表达下降,而芹菜素可以下调ROS的表达,提高SOD及NO的含量,并呈计量依赖性。4、高糖环境可使HUVEC细胞内p38MAPK蛋白磷酸化水平较对照组明显升高,一定浓度的芹菜素可下调高糖环境下HUVEC细胞内P38蛋白磷酸化水平。结论：T2DM大血管病变患者血清RBP4的表达可能与气虚、阳虚等虚损的加重有关,并与体重指数BMI呈正相关。芹菜素可以抑制高糖环境对HUVEC的损伤,对糖尿病患者血管内皮具有保护作用。芹菜素可以抑制高糖环境下HUVEC的粘附、聚集,改善氧化应激作用,说明芹菜素在改善动脉粥样硬化、防治糖尿病血管并发症方面应具有积极意义。其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路实现的。