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本论文研究了磁弹性无线生物传感器在生化分析中的应用。在外加交变磁场中,磁性膜片受磁场激发产生磁矩,将磁能转换为机械能,并产生沿长度方向伸缩振动,即磁致伸缩。当交变磁场频率与磁性膜片机械振动频率相等时,膜片产生共振,此时具有最大振幅,此时振动频率为磁性膜片共振频率。当磁性膜片传感器表面负载质量发生变化时,其共振频率也会随之改变。由于磁性膜片本身是磁性的,其伸缩振动产生磁通,产生的磁通可由检测线圈检测。磁弹性传感器中信号的激发与传送是通过磁场进行的,传感器与检测仪器之间没有任何物理连接,属于无线无源传感器,磁弹性传感器这一特点使得它在活体、在体分析中具有广泛的应用前景。利用这一原理,本文主要做了以下三个方面的应用研究工作:
(1)α-淀粉酶传感器。在磁弹性传感器表面固定一层淀粉凝胶,当α-淀粉酶水解淀粉时,随着传感器表面淀粉消耗,传感器共振频率也随之增加,传感器共振频率的变化速度和幅度正比于α-淀粉酶浓度。通过记录磁弹性传感器共振频率的变化对α-淀粉酶进行定量分析。实验中所制得的传感器能用于检测75~125U/ml范围内的α-淀粉酶。同时,利用尿素和甲胺磷对α-淀粉酶的抑制作用,测定0.3~8mmol/l范围内的尿素和0.02~0.2%范围内的甲胺磷。
(2)胰蛋白酶传感器。通过在传感器表面修饰一层pH聚合物制得pH传感器,然后在此传感器表面进一步固定胰蛋白酶制得胰蛋白酶传感器。胰蛋白酶水解底物N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)过程中生成H+,溶液pH值变小,导致传感器表面pH敏感膜发生收缩,传感器表面质量负载减少,最终导致传感器共振频率增加。用该传感器监测了固定化胰蛋白酶水解底物BAEE的动力学过程,并与游离酶水解BAEE的动力学参数进行了比较,胰蛋白酶的固定使得其活性下降了约50%。
(3)磁弹性传感器用于酸性磷酸酯酶活性测定。检测原理是以5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸对甲苯胺盐(BCIP)为底物,经酸性磷酸酯酶水解后生成兰色二聚物沉淀,该二聚物沉淀能紧密的附着在传感器表面,导致传感器共振频率发生变化,传感器共振频率变化幅度正比于酸性磷酸酯酶浓度。实验中通过记录传感器共振频率变化幅度来对酸性磷酸酯酶进行定量分析。该方法可用来检测1.5~15U/l酸性磷酸酯酶,检测限达到1.5U/l,与分光光度法相当。