福建山樱花及其近缘物种的杂交试验及分子鉴定

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福建山樱花(Prunus campanulata Maxim)是世界上需冷性最少、花色最为浓艳的樱花品种,但是人们对其了解甚少,除了日本开展了樱花与福建山樱花杂交育种研究,目前尚未有人对台湾种源的福建山樱花原种和变种进行品种改良的研究。本研究利用引种自台湾的福建山樱花原种和变种与寒樱、阿里山樱花、敬翁樱和薄墨樱进行杂交育种,并用SRAP标记分析亲本和子代之间的亲缘关系,研究结果如下:1.在对亲本的16个形状研究中,表现稳定可用于鉴定品种分类的性状是有无花序毛被、花冠毛被、萼片数量和形状、开花后反卷与否、萼筒的形状、花瓣瓣数、花瓣先端形状、花序、果实颜色性状等10个性状。2.8个亲本的花色在CIE L* a* b*表色系统坐标系上的分布情况。8个亲本的花色用色差计测定花色的明度L*值、色相a*、b*值,计算彩度C*和色相角h/°。8个亲本明度L*值与红绿属性a*值、彩度值C*值呈负相关,5号亲本花色的红色调最强烈,蓝色调最强,明度最小,彩度值最大;6号亲本花色的红色调最弱,蓝色调最弱,明度最大,彩度值最小,与肉眼观察结果一致。3.8个亲本花部器官11个性状的分析。11个性状的长宽测量用游标卡尺测量,4号亲本苞片长和宽、总梗和花梗长的值皆为最大值,花筒最长的是5号亲本,最长的花萼是8号亲本,花瓣最长的是6号和7号亲本,3号亲本花瓣最宽,1号亲本的雄蕊最长,雌蕊最长的是5号亲本。4.影响福建山樱花及其近缘物种的花部形态主要因素。主成分分析福建山樱花及其近缘物种形态分类的主要因素,结果显示花筒长、总梗长、花瓣长和宽、苞片宽等因素是福建山樱花及其近缘物种花部器官形态分化的主要因素。5.通过对27个组合杂种后代结实、催芽和播种苗成活率的统计,自交组合8号亲本得到的种子数最多,相同催芽时间8号亲本的催芽效果比4号亲本好,4号亲本的自交种子播种苗成活率高;杂交组合中以2号亲本作为父本,4号亲本作为母本时种子收获率较高,催芽效果较好,杂交种子成活率最高。6.8个亲本的花部形态聚类。8个亲本可明显被分为4个类群:3号、4号和2号亲本聚在一个大类,1号和5号亲本聚在一大类,7号和8号亲本聚在一大类,6号亲本单独聚成一类,与其他各大类群距离最远。7.建立福建山樱花及其近缘物种SRAP-PCR的反应体系,即25ul的反应体系中,dNTP浓度为0.12mmol/l,Taq酶浓度为1.00U,Mg2+浓度为1.50mmol/l,上下游引物浓度为0.30umol/l,其余为双蒸水补足。扩增反应程序为94℃预变性5min;94℃变性1min,35℃退火1min,72℃延伸1min,进行5个循环;94℃变性1min,50℃退火1min,72℃延伸1min,进行35个循环;72℃延伸10min;4℃或-20℃保存。8.13条引物共检测出111个等位基因,每个位点检测到的数目6~12个不等。平均每个位点观察等位基因数目为8.5个,多态率为84.6%。9.对8个亲本的SRAP数据进行聚类。8个亲本可分为3大类群:4号、5号、3号、2号和1号亲本聚成一大类群,6号亲本单独为一类群,7号和8号亲本聚成一类群。10.对亲本和子代的SRAP遗传距离的聚类。34个个体的聚类为1号亲本和6号亲本独立为一类群,2号亲本与杂交品种24和23聚为一类群;3号及其杂交种342、351、352、5号亲本自交品种551和552、5号亲本等的遗传距离较近聚为一大类群;4号亲本及其杂交种341、411、自交种441、442、443等聚为一大类群;7号亲本的自交种772和775的遗传距离较771和777、773和774近,前者先聚为一小类,后者分别独立聚为一小类,这三小类再与7号亲本和自交种776聚为一大类;8号亲本与其自交种883先聚为一小类,881和882、885和886由于距离较近,也独立聚为一小类,然后与自交种884和887再聚为一大类。
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