目的：腺病毒(adenovirus)是一种无包膜双链DNA病毒，分为7个组共55个血清型。该病毒可感染多种器官，能引起呼吸道疾病、结膜炎、胃肠炎、出血性膀胱炎等。国内外经常有腺病毒感染爆发流行的报道。因此，有效预防、控制及治疗腺病毒感染是亟待解决的问题。曾被使用过的腺病毒减毒疫苗和美国重新研发的减毒活疫苗存在一定危险性和局限性，临床上也尚无药物治疗腺病毒感染。为了防止类似“SARS”公共卫生突发事件的发生，保护人类生命健康，具有多种优点的基因工程疫苗研究得到重视。六邻体蛋白是腺病毒主要的结构蛋白，抗原性较其他结构蛋白强，可以刺激机体产生相应中和抗体。本实验针对腺病毒六邻体抗原性强的保守基底区域进行克隆，为研制腺病毒重组基因工程疫苗奠定基础，具有重要的社会意义及经济效益。　　 方法：应用生物信息学软件，对GenBank中已收录的人3型腺病毒核酸全序列进行比对分析，找出高度保守序列，结合抗原性预测的结果和六邻体蛋白三维空间结构暴露情况，对保守序列进行评价，确定了不同型别腺病毒六邻体所共有的型间共同的特异性抗原表位，选择了六邻体单体蛋白的基因序列进行克隆。以本实验室分离的腺病毒(HAdV3)基因组DNA为模板，PCR扩增目的片段，通过T载体非定向克隆后，与PQE31定向克隆构建原核表达质粒pQE31-hexon。　　 结果：通过生物信息学软件分析后确定人3型腺病毒六邻体中后段具有较好的抗原性和免疫原性，适合研发多效价的腺病毒疫苗，PCR扩增的产物长1155bp，成功构建了重组表达质粒pQE31-hexon。该重组蛋白序列在人3型腺病毒GB株的六邻体氨基酸序列上对应的位点是从540到919。　　 结论：所选择的目的片段具有较高的抗原性；成功构建了重组质粒pQE31-hexon。为进一步表达、纯化该蛋白做准备，为开发研制预防多型别HAdV感染的多价腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。