禽流感灭活疫苗能有效保护免疫鸡群,显著减少存在于鸡群和环境中的病毒数量,缩短其存活时间,有效地减少经济损失,是禽流感防治的主动措施和关键环节。灭活疫苗具有制备工艺简单、免疫效果确实、免疫持续期长久等特点。目前许多国家已使用商品化的禽流感灭活疫苗用以控制禽流感的发生。我国已研制成功不同亚型禽流感病毒灭活疫苗,并证明具有良好的免疫保护作用。20多年来,灭活疫苗的制备技术不断改进,并已经广泛应用于禽类免疫,大量的临床试验已证实其可有效防制临床发病和死亡。在灭活疫苗的研究中发现,疫苗中血凝素抗原含量是疫苗免疫效果的决定性因素。为了提高禽流感疫苗抗原稳定性,延长保存时间,增强免疫效果,本研究通过用不同保存时间的抗原制备的禽流感疫苗的效力研究;抗原稳定剂的初步筛选研究;抗原稳定剂的优化研究;抗原稳定剂联合使用效果研究等证明:①禽流感血凝素抗原在甲醛灭活后,在冷藏过程中,甲醛仍和病毒的表面血凝素发生反应,影响病毒自身抗原性。冷藏方法保存3个月时,其抗原重要指标HA效价为0,抗原不能用于生产配苗;②通过在抗原中添加不同浓度的焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠可以使试验组的抗原血凝价降低缓慢,且0.3%含量组的效果优于0.1%和0.2%含量组,说明焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠对该抗原中的甲醛有阻断作用,可有效保护抗原表面血凝素,而添加三个浓度亚硫酸钠组抗原血凝价在一周后均降为0,不能起到稳定抗原血凝价的作用;③通过抗原稳定剂的优化研究确定:抗原中分别加入0.4%的焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠对抗原血凝价有一定保护作用;④抗原稳定剂联合使用效果证明:灭活抗原中同时加入0.2%的焦亚硫酸钠和亚硫酸氢钠效果较好,抗原保存6个月,其血凝价仍保持最初灭活时水平,效果良好。总之,本试验通过添加焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、甘油、硫代硫酸钠等化学试剂,筛选出了比较适合的抗原稳定剂,达到了稳定抗原血凝价的目的。按照现行《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》(2001年版)(以下简称“标准”)免疫SPF鸡,以不含稳定剂的抗原疫苗作对照,添加焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和甘油的试验组取得了较好的效果。在本试验条件下可获得安全有效的禽流感抗原,对生产有较强的指导意义。