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目的:(1)设计与合成卤代甲氧查尔酮类化合物并进行结构鉴定。(2)对化合物进行体外抗宫颈癌活性研究,筛选抗癌活性强的候选药物。(3)将选定的候选药物与拟定蛋白靶点MDM2进行分子对接,探究候选药物与MDM2靶点蛋白结合方式及结合位点。方法:(1)采用Claisen-Schmidt缩合反应原理,通过取代苯乙酮和取代苯甲醛缩合制备相应的化合物,其中先导化合物异甘草素(ILG)分别采用酸法、碱法、微波辅助的固相合成法进行制备。卤代甲氧查尔酮类化合物采用KOH/EtOH法、研磨法合成相应化合物;酸法采用硼酸作为催化剂,乙二醇作溶剂;碱法采用KOH作为催化剂,无水乙醇作为反应溶剂;微波法采用采用中性Al2O3为反应介质,KOH作为催化剂,微波作为固相反应的条件;研磨法采用中性Al2O3为反应介质,KOH作为催化剂,研磨作为反应条件。利用13C-NMR、1H-NMR对化合物结构进行鉴定;(2)以宫颈癌HeLa、SiHa和仓鼠卵巢CHO正常细胞,作为受试细胞,合成的化合物作为试药,顺铂作为阳性对照药,利用MTT法测定化合物对宫颈癌细胞和仓鼠卵巢正常细胞的增殖抑制浓度IC50;(3)对所选定的活性较好的化合物进行细胞凋亡作用及细胞周期实验,将药物作用24h后的SiHa细胞使用BD试剂盒(FITCAnnaxin/PI)对细胞进行染色,用流式细胞仪进行检测;(4)对筛选出的化合物用AutoDock Vina 1.1.2软件与MDM2蛋白进行分子对接实验。结果:(1)合成出18个查尔酮类化合物,产率在38～88%之间;(2)在10～50μg/mL的浓度范围内,各化合物对宫颈癌HeLa和SiHa细胞均具有较明显的增殖抑制作用,通过化合物对宫颈癌细胞及仓鼠卵巢CHO正常细胞增殖抑制活性的结果分析,发现其中4-氯-2’,4’-二甲氧基查尔酮(化合物3)、3,4,5-三甲氧基-2’,4’-二甲氧基查尔酮(化合物7)、3,4,5三甲氧基-3’-羟基-4’-甲氧基查尔酮(化合物15)显示出较高的活性,即化合物3、7、15在对HeLa细胞作用48 h时的IC50值分别为11.30、9.34和8.12 μg/mL,活性强于先导化合物ILG IC50(25.36μg/mL)(P<0.05);各化合物对SiHa细胞作用72 h时IC50值分别为10.78、10.21、3.98 μg/mL,展现出较显著的体外抗宫颈癌活性。三个化合物对仓鼠卵巢CHO正常细胞作用48 h时的IC50值分别为25.34、10.44、10.43 μg/mL,与先导化合物ILG的毒性相近,说明化合物3、7、15对正常细胞的毒性低;(3)通过细胞凋亡作用研究发现,化合物3、7、15对宫颈癌SiHa细胞均具有较高的诱导凋亡作用。其中化合物3在浓度为25 μg/mL时,在作用48时的细胞凋亡率49.0%,同浓度时,化合物7的细胞凋亡率45.1%,化合物15的细胞凋亡率41.2%。化合物3对SiHa的细胞周期实验研究结果发现,该类化合物对宫颈癌细胞的增殖阻滞在G2/M期;(4)分子对接结果显示,化合物3与MDM2靶标蛋白的结合自由能为-7.2 kcal/mol,化合物7的-6.2 kcal/mol,化合物15的-6.3 kcal/mol,此结果表明,3个化合物都能与MDM2蛋白具有较高的结合性。化合物3对接后结合构象显示,其4-氯苯基结构能吻合靶点的D位点上,和原晶体结构中的7HC的6-氯吲哚环的苯环部分具有良好的叠合性,而2,4-二甲氧基苯基则朝向B位点,可以和周围氨基酸残基形成氢键结合,4-氯苯基则深入活性口袋的内部,形成强烈的疏水性相互作用。结论:通过18个衍生物的合成和活性研究结果显示,对先导化合物ILG进行卤代和甲氧基化修饰,可明显提高抗宫颈癌活性,而对正常细胞的毒性相对较低,其中,化合物3、7和15对两种宫颈癌细胞的抑制活性和促进凋亡作用最显著,其中化合物3可以使宫颈癌SiHa细胞的增殖阻滞在G2/M周期,所选定的三个衍生物可作为具有深入研究和研发潜力的候选药物。分子对结果表明,化合物3与拟定靶标MDM2蛋白能形成稳定的复合物,具有较高的靶点吻合性。