碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子-β1在腰椎肥厚黄韧带中的表达及作用研究

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目的:对纤维化相关细胞因子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA在腰椎黄韧带肥厚各阶段的表达进行检测,明确其在腰椎黄韧带肥厚过程中的作用,探索黄韧带肥厚的机制。背景:腰椎黄韧带肥厚是腰椎管狭窄症的主要病理改变之一,但其病理机制并不清楚,从力学上说,是因为椎间盘退变后不稳造成。有研究认为黄韧带肥厚是由于持续的纤维化介导的疤痕组织积聚的结果。虽然bFBF和TGF-β1在皮肤疤痕愈合中的纤维化作用研究有了实质性的进展,但其在黄韧带中的作用目前还未见报道。正是基于其相似的纤维化过程,本研究认为,在黄韧带纤维化肥厚的过程中,bFBF和TGF-β1可能有着相似的作用。方法:本研究分为三个组:对照组8例、突出组(单纯腰椎间盘突出症患者黄韧带)20例、腰椎管狭窄症组20例,分别作为正常黄韧带、黄韧带肥厚早期和晚期。分两个部分进行研究:1、影像学测量。用MRI机自带软件测量所取各组黄韧带厚度,由2人独立测量后取平均值作为最终测得值,用统计学比较各组黄韧带之间厚度的差别。2、在影像学统计有意义的基础上,对各组黄韧带中bFGF、TGF-β1 mRNA含量用实时定量RT-PCR的方法进行检测,比较其在各组中的表达,对其在黄韧带肥厚过程中的作用进行探讨。结果:腰椎管狭窄症组黄韧带厚度为4.86±0.51mm,突出组2.44±0.29mm,对照组2.26±0.14mm;组间比较,腰椎管狭窄症组黄韧带明显比突出组、对照组肥厚,p值均<0.001;突出组黄韧带比对照组稍厚,但没有统计学意义,p>0.05。bFGF在突出组和腰椎管狭窄症组中的表达均明显高于对照组(P<0.01,P<0.01),在腰椎管狭窄症组中的表达稍低于突出组,但两组比较没有统计学意义(P>0.05)。TGF-β1在突出组中的表达明显高于对照组(P<0.01),在腰椎管狭窄症组中的表达低于突出组(P<0.05),但高于对照组(P<0.05)。结论:1、本课题结合临床病例对黄韧带肥厚进行分期,并且结合前人的研究将研究的对照组年龄和纳入标准进行界定,提出了合理的分组对照。2、本研究利用定量PCR方法同时检测腰椎管狭窄症和腰椎间盘突出症患者黄韧带中bFGF、TGF-β1 mRNA的表达,发现二者均高于对照组,但这两个细胞因子在黄韧带肥厚早晚期中的表达量走向并不一致。TGF-β1 mRNA早期较高,而晚期表达较低,而并不完全阴性;bFGF则持续的高表达。证实此二因子在黄韧带肥厚中发挥不同的作用,早期椎间不稳导致黄韧带受牵拉,刺激TGF-β1分泌增加,触发并介导黄韧带的纤维化,而晚期的低表达说明其也参与了黄韧带晚期的持续纤维化;bFGF的持续高表达则可能说明其参与了黄韧带肥厚的整个过程。
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