益肾蠲痹法对强直性脊柱炎异位骨化信号通路BMP2-Smad1/5的影响

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目的:①探讨益肾蠲痹法对小鼠脊柱韧带BMP2、Smad1/5蛋白表达的影响,为临床治疗强直性脊柱炎异位骨化提供实验依据。②探讨益肾蠲痹法对强直性脊柱炎患者BASMI的影响,评价临床常规治疗基础上联合益肾蠲痹法对强直性脊柱炎患者脊柱功能活动度影响,为临床治疗强直性脊柱炎异位骨化提供临床依据。方法:实验研究方法:①选取24只BALB/c小鼠,随机选取6只设为阴性对照组,余下18只小鼠腹腔注射75μg重组人VG1和150μg弗氏完全佐剂。4月后取3只验证模型。造模成功后随机分为模型组、益肾蠲痹组和双氯芬酸组,每组各5只小鼠,给药4周。②饲养于SPF级屏障环境饲养房,12/12 h昼夜循环,环境温度20~25℃,自由进食和饮水,给药期间,观察小鼠体重变化。③采用免疫组化法检测各组小鼠韧带组织中Wnt5a和Ror2的差异表达,采用Western Blot检测各组小鼠韧带组织中BMP2表达和p-Smad1/5磷酸化水平的变化。临床研究方法:跟随导师门诊及住院部学习过程中,收集符合本实验要求的患者信息,予以随访,选出20例符合要求的AS患者,分为西药组(12例)和中药联合西药组(8例),分别追踪记录其治疗六个月后的BASMI评分分值,予以统计分析,客观评价益肾蠲痹法对治疗强直性脊柱炎在改善脊柱活动度方面的疗效。结果:实验研究结果:①体重变化:造模期间,阴性对照组体重稳定增加,造模组体重无明显变化。给药期间,给药组动物体重稍有增加,模型组动物体重无明显变化。②免疫组化结果:与阴性对照组小鼠相比,模型组中小鼠脊柱旁韧带Wnt5a和Ror2表达上调,药物干预4周后,小鼠脊柱旁韧带Wnt5a和Ror2表达均下降。③Western Blot结果:与阴性对照组小鼠相比,模型组中小鼠脊柱旁韧带BMP2和p-Smad1/5表达上调(P<0.05),药物干预4周后,小鼠脊柱旁韧带BMP2和p-Smad1/5表达均不同程度下降(P<0.05)。临床研究结果:西药组(双氯芬酸)与中药联合西药组的患者各自的BASMI的评分分值在治疗6个月后与首诊相比,组内有比较明显的统计学差异(P<0.05),且中药联合西药组治疗后的BASMI评分分值在数值上下降程度要优于单纯使用西药组,但组间比较t检验P>0.05无明显统计学差异。结论:①益肾蠲痹法有抑制Wnt5a和Ror2表达,下调BMP2和p-Smad1/5表达的作用,从而起到调节骨代谢平衡,抑制非骨组织中的骨形成,预防异位骨化,有保护关节功能的作用。②治疗前后比较,西药基础上联合益肾蠲痹法治疗强直性脊柱炎可有效降低患者BASMI评分分值,改善脊柱活动度,保护关节功能,提高生活质量。
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