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水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)是水痘和带状疱疹的致病病原体,在儿童初次感染引起水痘,恢复后病毒潜伏在体内,少数病人在成人后病毒再激活而引起带状疱疹。目前我国水痘的真实发病率很高,是突发公共卫生事件的主要原因之一。带状疱疹的发生与VZV特异性细胞免疫水平密切相关,当免疫水平下降时,VZV被激活而发生带状疱疹。目前针对水痘和带状疱疹的治疗均无法完全清除体内病毒,而疫苗的接种可以有效的预防这两种疾病。随着水痘疫苗接种人数的增多和带状疱疹疫苗的推广应用,迫切需要建立一种简便、快速、准确的方法评价疫苗的细胞免疫效果,评价成人的VZV特异性CMI,判断其是否为易感人群,是否需接种疫苗预防带状疱疹。目前免疫学中检测VZV特异性细胞免疫应答的方法主要有细胞内细胞因子染色法、皮肤试验、IFN-γ Eli spot和IFN-γ释放试验,前三者分别存在灵敏度低、实验室无法实施和操作繁琐等缺点,而且都不能定量。近年发展的基于ELISA的IFN-γ释放试验正逐渐被认可,已应用于TB/LTB的诊断并且有相关商品化试剂盒批准上市,在HCMV和VZV CMI检测上的应用也有诸多报道。基于以上研究,本论文应用这一新的IFN-γ释放试验评价成人的VZV特异性CMI,考察研究对象接种水痘疫苗后细胞免疫应答水平的变化。在本研究中,我们首先优化IFN-γ释放试验条件,确定了刺激抗原的处理方式、抗原加入量、全血与抗原共孵育的最佳时间、全血稳定性等,确定试验的最佳条件。然后随机选择12名成人作为研究对象,在接种前采集全血用于ELISA试验检测其中IFN-γ释放水平,考察未知人群针对VZV的CMI水平。每人接种水痘减毒活疫苗一支,21天后采集全血检测IFN-γ释放水平,与接种前水平进行比较,观察个体接种疫苗后CMI水平的变化。本研究试验结果发现,(1)刺激抗原的处理方式、抗原加入量、全血与抗原共孵育的最佳时间、全血稳定性等均对干扰素-γ释放有影响,紫外灭活的水痘抗原刺激效果较好,全血与抗原共孵育48h左右较为合适,全血样本应尽快进行孵育试验；(2)12名研究对象接种水痘减毒活疫苗前全血中干扰素-γ释放水平存在差异,接种疫苗后均有不同程度提高,干扰素-γ释放水平几何平均值(GMT)接种前后分别为6.13pg/ml和234.75pg/ml。由于年龄、性别以及身体状况等不同,增长的倍数和数值在个体间均存在较大差异。(3)由于样本量有限,无法进行统计分析,难以确定高危人群干扰素-γ释放水平阂值,接下来将扩大样本量进行研究,确定水痘-带状疱疹易感人群的干扰素-γ释放水平范围,期望应用该法指导带状疱疹临床研究中高危人群的筛选。