胆汁酸在诱导Barrett’s食管肠上皮化生作用中的机制及临床意义

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背景  Barrett’s食管(Barrett’s esophagus,BE)是胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)最严重的并发症,同时也是食管腺癌最重要的癌前病变。在西方国家,BE的发病率呈逐年上升趋势。目前关于BE的发生机制尚未阐明。过去认为,长期酸暴露可以引起BE,但也有学者提出胆汁酸在BE发生发展中的作用更为重要。  目的  本实验拟研究不同浓度胆汁酸对人食管上皮细胞(BAR-T)细胞形态、超微结构的影响,探讨BE化生的机制及其临床意义。  方法  (1)购买人原代食管BAR-T细胞,在我院中心实验室用DMEM含血清的细胞培养液进行细胞培养,并进行传代、冻存、复苏及化学刺激。  (2)挑选生长良好的细胞,每天分别用250umol/L、400umol/L、500umol/L胆汁酸刺激3次,连续7天,并在倒置相差显微镜下观察细胞形态改变,在透射电镜下观察超微细胞结构改变。  结果  (1)对照组细胞组在显微镜下可见正常细胞形态,当细胞生长至7天出现多数细胞接触抑制、细胞凋亡;实验组细胞生长时间较对照组长,有正常接触抑制,凋亡少见。  (2)在透射电镜下:对照组可见正常细胞微结构,实验组可见线粒体肿胀变形、核仁边集、双核仁及自噬小体形成。  结论  (1)BAR-T细胞在胆汁酸刺激下出现形态、结构变化。  (2)不同浓度胆汁酸对BE细胞系作用不同,随着浓度增加,细胞出现异型增生趋势。
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