玉米须黄酮提取、纯化及其降糖研究

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黄酮类化合物是玉米须中主要生物活性成分,具有多种药理价值。本研究以玉米须为原材料,通过不同处理方式对玉米须中的黄酮进行提取、纯化,通过细胞实验研究不同方法提取的玉米须黄酮的降糖效果,主要研究结果如下:1.采用溶剂法提取玉米须黄酮,通过单因素与正交实验优化其提取工艺,获得最佳提取工艺参数为:乙醇浓度60%、温度60℃、时间2.0h、料液比为1:20。在最佳工艺条件下玉米须黄酮得率为1.536%。2.采用超声波辅助法提取玉米须黄酮,通过进行单因素和正交实验优化提取工艺,获得最佳提取工艺参数为:超声波功率为400W、超声波处理时间为20min、乙醇浓度60%、料液比为1:20。在最佳工艺条件下玉米须黄酮得率为2.263%。3.采用微波辅助法提取玉米须黄酮,通过进行单因素和正交实验优化提取工艺,获得最佳提取工艺参数为:料液比1:50、微波辐射温度70℃、微波时间8min在最佳工艺条件下玉米须黄酮得率为1.847%。4.三种方法对比表明,超声波辅助法和微波辅助法提取效果优于溶剂法;其中超声波辅助法得率最高,且操作简单、时间短,适于工业化生产。5.采用大孔树脂纯化玉米须黄酮,通过单因素实验来确定纯化最佳条件为:pH=3、乙醇浓度60%、流速1.0 mL/min、洗脱体积5 BV,在此条件下,溶剂法、超声波辅助法、微波辅助法的黄酮提取液吸附率分别为70.32%、85.16%、72.08%。6.采用三种方法提取玉米须黄酮,验证其对胰岛素抵抗型HepG2细胞的改善作用,通过测葡萄糖的消耗量以及对甘油三酯(TG)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)、葡萄糖激酶(GK)活性的影响。实验表明,培养后的抵抗性HepG2细胞对葡萄糖有消耗能力,对甘油三酯、葡萄糖-6-磷酸酶分解有抑制作用,并使葡萄糖激酶活性提高,三种方法提取的玉米须黄酮均具有降糖作用,但对测试指标影响仍有差异,其中对葡萄糖的影响,微波辅助法>超声波辅助法>溶剂法;对甘油三酯(TG)的影响,微波辅助法<溶剂法<超声波辅助法;对葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的影响,溶剂法<微波辅助法<超声波辅助法;对葡萄糖激酶(GK)的影响,超声波辅助法>微波辅助法>溶剂法。综上所述,微波辅助法和超声波辅助法提取的玉米须黄酮降糖作用比溶剂法更显著。7、对玉米须黄酮提取液通过高效液相色谱法分离验证,液相色谱图与标准品谱图比较分析得到:三种方法提取的玉米须黄酮均主要存在三种单体物质,分别为异鼠李素,芒柄花素,木犀草素。本研究对玉米须黄酮进行的提取、纯化,确定了三种方法的工艺参数。然后通过细胞实验探讨了三种提取方法得到的玉米须黄酮降血糖作用,为玉米须黄酮的进一步研究、开发和利用奠定了基础。
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