围刺、艾灸对硬皮病小鼠模型COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白影响的实验研究

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目的:通过背部注射博来霉素建立BALB/C小鼠硬皮病模型,采用围刺、艾灸治疗BALB/C小鼠硬皮病模型,通过观察各组小鼠皮肤、肺组织病理变化、皮肤厚度及皮肤组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白的表达,探究围刺、艾灸干预BALB/C小鼠硬皮病模型COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达的机理;为临床治疗硬皮病提供实验理论依据。  方法:将60只BALB/C雄性小鼠随机分为6组:正常组、模型组、肝素钠组、围刺组、艾灸组、联合组,每组10只。2、采用盐酸博莱霉素注射液注射到小鼠背部皮下造模(300μg/ml,0.2ml/次,1次/日,连续30天),造模成功后,空白组与模型组外用生理盐水,1次/日;肝素钠组皮损处外用肝素钠软膏,1次/日;围刺组用0.16寸针具围刺皮损局部,留针30min,1次/日;艾灸组采用艾条回旋灸,治疗30min,1次/日;联合组采用围刺、艾灸联合治疗,1次/日;连续治疗30天后处死,取背部皮肤组织与肺组织,观察各组小鼠皮肤、肺组织病理变化、皮肤厚度及皮肤组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白的表达情况。  结果:  1、通过小鼠一般情况、组织病理、真皮厚度增加与正常组对比提示硬皮病小鼠模型建造成功;  2、围刺组小鼠背部皮肤硬化程度逐渐改善,毛发生长状况优于未围刺区域;  3、艾灸组小鼠背部皮损逐渐加重,随着艾灸天数增加逐渐出现皮肤肿胀、溃疡、结痂;  4、模型组小鼠真皮厚度与正常组对比有统计学意义,存在明显差异,造模成功;艾灸组与模型组比较有统计学意义,存在明显差异;病情加重。肝素钠组、围刺组、联合组与模型组对比,有统计学意义,存在明显差异;各组均有疗效。模型组小鼠COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达与正常组对比有统计学意义,存在明显差异;艾灸组与模型组比较有统计学意义,存在明显差异;肝素钠组、围刺组、联合组与模型组对比,有统计学意义,存在明显差异。  结论:  1、通过给小鼠背部皮下盐酸博莱霉素注射液300μg/ml,0.2ml/次,1次/日,连续30天可成功建立硬皮病小鼠模型。  2、围刺、艾灸联合可减少硬皮病小鼠模型中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白的表达,从而改善皮肤的厚度及硬度;降低皮肤纤维化程度。  3、单纯使用艾灸可加重硬皮病小鼠模型皮肤纤维化程度,可能与艾灸加重皮肤炎症有关,或者硬皮病小鼠模型不是寒证型。  4、临床上免疫组化检测COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白对硬皮病的诊断和治疗有重要意义。
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