目的:本研究按照外用栓剂的工艺要求,对“雷氏六神丸”进行剂型改造并确定其制剂工艺、质量标准等;通过构建白念珠菌阴道炎小鼠模型,观察六神栓对白念珠菌阴道炎的治疗作用,并确立六神栓外用治疗白念珠菌阴道炎的剂量,为临床应用提供实验依据。方法:第一部分为六神栓制备工艺的研究,通过处方筛选和制备工艺的摸索,制备阴道用六神栓。第二部分对六神栓进行了质量研究。按照中国药典(2005年版)一部(附录IW)有关栓剂项下规定,对六神栓进行了性状描述、理化鉴别及常规项检查,采用薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC),用硅胶G高效薄板,对牛黄进行定性鉴别。采用气相色谱法测定麝香酮和冰片的含量,采用高效液相色谱法测定酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量,分别通过建立标准曲线,加样回收率实验和稳定性实验等确立自制栓剂的质量标准。同时以三氧化二砷为质控指标,对复方中三氧化二砷进行了限量测定。第三部分是六神栓对小鼠白念珠菌阴道炎治疗作用的实验研究:1观察六神栓不同剂量对小鼠阴道黏膜的刺激性;2构建小鼠白念珠菌阴道炎模型; 3探讨六神栓对白念珠菌阴道炎小鼠模型的治疗作用。结果:第一部分实验结果:以甘油明胶为基质,以复方中药六神丸的药粉为活性成分,制备局部(阴道)用栓剂。第二部分实验结果:(1)自制栓剂物理性状检查,符合2005版药典规定。(2)以胆酸对照品为比照,检出牛黄。(3)酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的标准曲线均在0.192～1.728ug之间有良好的线性关系。测得三批六神栓中酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的平均含量为0.6303mg/粒。(4)冰片的标准曲线在0.663～5.304ug之间线性关系良好。测得三批六神栓中冰片的平均含量为8.60mg/粒。(5)气相色谱法测定麝香酮的含量,标准曲线在0.0428～0.3852ug之间有良好的线性关系。测得三批六神栓中麝香酮的平均含量为0.509mg/粒,加样回收率为98.4%,RSD为0.50%。(6)三氧化二砷的含量小于万分之五,符合200版药典规定的范围。第三部分实验结果:(1)六神栓对小鼠阴道黏膜刺激实验:给药7天内,各剂量的六神栓组小鼠的饮食、活动、精神状态、粪便等均正常,无死亡现象,与生理盐水组无明显差异。组织病理学检查结果:生理盐水组和低、中、高剂量(用药剂量分别为11.3、22.5、45mg/只)的六神栓组小鼠阴道黏膜表皮层次清楚,均可见单层排列的柱状基底细胞;黏膜下血管未见明显扩张、充血;结缔组织轻度水肿;真皮内少量炎细胞浸润。大剂量组(90mg/只)小鼠阴道黏膜表皮细胞内水肿,黏膜下血管明显扩张、充血;结缔组织水肿;真皮内较多炎细胞浸润。表明大剂量六神栓组对小鼠阴道黏膜有明显的刺激作用,不宜用于治疗小鼠白念珠菌阴道炎。(2)白念珠菌阴道炎小鼠模型的构建:造模后第2天,涂片真菌镜检可见大量孢子和阴道上皮细胞。第4天,涂片真菌镜检可见较多假菌丝和芽生孢子,大量阴道上皮细胞。组织病理切片阴道壁黏膜浅层中可见大量假菌丝和孢子。(3)六神栓对白念珠菌阴道炎小鼠模型的治疗作用:用药7天后,生理盐水组、低、中、高剂量六神栓3组及保妇康栓组小鼠阴道灌洗液菌落计数分别为6.13±0.25、5.96±0.13、5.52±0. 24、5.17±0.08、5.15±0.1。可见不同剂量的六神栓均能降低阴道灌洗液菌落计数,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:1.试验所制栓剂,外观光滑,色泽均匀,有适宜硬度,无气泡,三批栓剂质量差异均﹤5%,融变时限检查,3粒栓剂均在60min内全部溶解,符合2005版药典规定,质量评价合格。2.试验中成功建立了麝香酮、冰片和酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的标准曲线,并测定了栓剂中麝香酮、冰片和酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量,无其它成分干扰,回收率和重现性均较好,操作简便,符合制剂质量控制范围的要求。为了用药的安全,本实验还对六神栓中的三氧化砷进行了限量的测定,结果符合药典的规定。3.在一定剂量范围内,六神栓对小鼠阴道的刺激性小,均可用于治疗白念珠菌阴道炎。4.六神栓外用对白念珠菌阴道炎具有一定的治疗作用,在一定剂量范围内,随着药物剂量的增加,其治疗效果增加。