羊毛纤维TGase酶促酰基转移反应的研究

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谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase,简称TGase)能催化蛋白质大分子中谷氨酰胺剩基上的γ–羧酰胺基(酰基供体)和赖氨酸剩基上的ε–氨基(酰基受体)发生酰基转移反应,形成蛋白大分子间ε–(γ–谷胺酰)赖氨酸异肽键共价交联。本文通过TGase催化酰基转移反应来实现羊毛生物接枝功能化改性,先选用酪蛋白作为模拟底物,ε–聚赖氨酸(ε-PLL)作为酰基受体,在均相体系中进行尝试性实验,再对目标底物—羊毛的酶促酰基转移反应进行研究,并揭示了TGase催化羊毛接枝反应的机理;最后还研究了TGase催化羊毛接枝其他酰基受体的效果。实验结果表明:模拟底物酪蛋白在均相体系中同时发生了自交联反应和接枝反应,同时酪蛋白的十二烷基磺酸钠–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)谱图和接枝前后酪蛋白的DSC热分析曲线进一步证明了接枝反应的发生。非均相羊毛体系的整体反应程度比酪蛋白体系小,经2,4,6–三硝基苯磺酸(TNBS)处理前后体系的氨态氮浓度的变化结果表明,在TGase的催化作用下,体系同时发生了羊毛的自身交联反应以及与ε-PLL的接枝反应。经不同处理羊毛的DSC热分析曲线、SEM电镜图以及氨基酸分析的结果进一步佐证了羊毛体系接枝反应的发生。另外,接枝后的羊毛亲水性得到很大的提高,表现为润湿时间的缩短以及抗静电效果的提高;且接枝后的羊毛对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有很好的抗菌效果,晕圈法抗菌测试的结果分别有1.6mm和1.75mm的抑菌带产生。通过单因素实验,对体系的反应条件进行优化,得到的结论是:TGase较佳用量为20U/g织物、ε-PLL较佳浓度为2%o.w.f、处理时间为24h、处理温度为40℃。TGase催化羊毛接枝其他酰基受体的研究结果表明:TGase可以成功的催化羊毛接枝壳聚糖和氨基磷酸盐。FITC—壳聚糖接枝的荧光图片和SEM电镜图进一步佐证了羊毛接枝壳聚糖具有较好的效果。
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