基于CdS-PAMAM/GNPs膜的电化学发光免疫传感器的构建及其对毒品的超灵敏检测

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毒品一般是指使人形成瘾癖的药物,通常分为麻醉药品和精神药品两大类。吗啡和氯胺酮分别属于鸦片类和非鸦片类麻醉品,它们对中枢神经系统具有强烈的麻醉和镇痛作用。作为毒品,它们会对社会安定和吸毒人员身心带来严重的危害;然而,作为临床的麻醉药品,它们具有解除病人疼痛的积极作用。因此,建立简便而灵敏的吗啡和氯胺酮检测方法具有重要的现实意义。本论文采用枝状聚合物聚酰胺胺(PAMAM)模板法,合成得到粒径均匀分散性好的CdS-PAMAM量子点(QDs),构筑基于CdS-PAMAM/纳米金(GNPs)薄膜的电化学发光(ECL)免疫传感器,旨在将灵敏的电化学发光检测技术与高选择性的免疫反应相结合,建立具有发光信号强、选择性好、稳定性高的毒品检测灵敏分析方法。本文主要开展了吗啡和氯胺酮电化学发光免疫传感器研究,获得了理想的分析性能及满意的测定结果。主要研究工作及研究结论如下:第一部分,CdS-PAMAM/GNPs纳米薄膜电极的构筑及性能以PAMAM为聚合物模板,成功合成了高质量的CdS-PAMAM QDs,透射电镜(TEM)显示CdS-PAMAM QDs粒径约为4nm,具有很好的分散性和稳定性。继而利用PAMAM大量的活性基团将CdS-PAMAM QDs有序而牢固的组装到电沉积GNPs膜表面,构建基于CdS-PAMAM/GNPs纳米薄膜电化学发光传感器。采用扫描电镜(SEM)技术考察了组装过程中该膜电极的表面形貌。研究了CdS-PAMAM/GNPs/Au电极在含K2S2O(8共反应剂)的PBS中的电化学发光行为。结果表明,电沉积GNPs与PAMAM的协同作用,促进了电极的电子转移,有利于量子点与共反应试剂K2S2O8反应的发生,从而使电极的电化学发光强度大大增强,而直接电沉积技术结合PAMAM表面活性基团与纳米金键合作用,不仅使电极组装方法简单易行,且有更好的电化学发光稳定性。第二部分,CdS-PAMAM/GNPs薄膜电化学发光免疫传感器的构建及其对吗啡和氯胺酮的灵敏检测在获得良好发光性能的CdS-PAMAM/GNPs纳米复合膜基础上,进一步以戊二醛(GLD)为连接剂,将吗啡或氯胺酮抗体组装到该纳米复合膜表面,得到相应的ECL免疫传感器。采用SEM、循环伏安(CV)以及电化学阻抗(EIS)等技术考察了电极组装过程的表面形貌及电化学性能。研究了该免疫传感器的ECL行为,并对抗原抗体之间免疫反应条件进行了优化:以pH=7.4含0.1M K2S2O8的PBS为反应体系,孵育时间分别为30min(吗啡)和25min(氯胺酮),孵育温度为30℃。在最优化条件下,该ECL免疫传感器对吗啡和氯胺酮有良好的线性响应,线性响应范围分别为0.2-180ng/mL(吗啡)和0.2-220ng/mL(氯胺酮),检测限分别为0.067ng/mL(吗啡)和0.067ng/mL(氯胺酮)。该法与其它毒品分析方法相比具有更高的灵敏度和更低的检测限,和同类免疫传感器相比有更宽的线性范围和较高的灵敏度。且该免疫传感器具有稳定性高,抗干扰性好,可进行多次再生使用的优点。将其用于实际样品检测,也得到了满意的结果。
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