FOXM1对食管鳞癌细胞增殖和迁移能力影响的研究

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食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,食管鳞癌(ESCC)和食管腺癌(EADC)是食管癌两种主要的类型,西方国家以腺癌为主,而包括中国在内的亚洲地区以鳞癌居多。近些年尽管外科手术切除法、化学疗法以及放射线疗法取得了一定的疗效,但ESCC患者的治疗预后效果仍然较差。Fockhead box M1 (FOXM1)是细胞周期中重要的调节分子,在细胞增殖过程中,它调节细胞进入G1/S以及G2/M,并且保证有丝分裂过程中纺锤体的完整性。研究发现,在乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌等恶性肿瘤组织中FOXM1表达量升高,然而它在食管鳞癌发生和转移中的作用尚不清楚。本研究通过改变食管鳞癌细胞TE-1中FOXM1的表达水平,探讨FOXM1对食管鳞癌细胞增殖和迁移能力的影响。构建3组针对FOXM1基因不同位点的干扰载体(pLKO.1-FOXM1 shRNA 1,pLKO.1-FOXM1 shRNA 2,pLKO.1-FOXM1 shRNA 3)以及表达载体iduet011a-FOXM1、iduet011a-N-TAP-FOXM1,与病毒包装质粒(pCMV-DR8.2,pCMV-VSV-G)共转染HEK293T细胞,包装病毒后侵染食管鳞癌TE-1细胞,利用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定株。Western blot检测稳定株FOXM1的表达水平,利用MTT实验和划痕实验分析FOXM1表达水平下调对TE-1细胞增殖能力和迁移能力的影响。结果表明:RNA干扰可下调FOXM1的表达水平,但3组干扰载体抑制FOXM1表达的能力不同,RNA干扰组pLKO.1-FOXM1 shRNA 2的抑制效果最好;MTT实验结果表明(与阴性对照组相比),在48h,72h时RNA干扰组细胞的增殖能力有所下降;划痕实验结果也显示FOXM1表达水平下调后TE-1细胞的迁移能力明显减弱。体外实验证实下调FOXM1的表达可抑制食管鳞癌细胞的增殖和迁移,这为进一步体内研究FOXM1在食管鳞癌发生和转移中的作用提供了理论和实验依据。
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