竹柳中黄酮类化合物的提取纯化和鉴定

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:wodelvtu
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竹柳作为竹和柳杂交的新树种,具有多种特性。竹柳作为木材被广泛应用于工业生产中,具有很高的经济价值。但目前对竹柳中的活性成分还没有研究,实验发现竹柳中含有黄酮类成分,黄酮具有多种生理活性,如抗氧化、抗肿瘤、抑菌、降血脂、预防心血管疾病等。本文以竹柳为研究对象,对竹柳中的黄酮类化合物进行提取和纯化工艺的研究,确定最优的提取和纯化工艺,采用液相-质谱联用技术分析其中的黄酮类化合物,采用高速逆流色谱制备单体化合物并借助红外光谱技术和核磁共振波谱技术对竹柳中的黄酮类成分进行分析鉴定,为竹柳中黄酮类活性成分的研究提供了理论依据,也对竹柳的综合利用起到积极意义。主要研究内容和实验结果如下:1.采用乙醇回流提取法对竹柳中的黄酮类化合物进行提取,通过单因素实验分别考察提取温度、料液比、乙醇浓度、提取时间对黄酮得率的影响,确定各因素的适宜水平,在单因素实验的基础上,进行正交实验,对提取工艺进行优化,得到竹柳中黄酮类化合物的最优提取工艺为提取温度80℃、料液比1:40 (g/mL)、乙醇浓度55%、提取时间2 h,此条件下,黄酮得率为4.0%。2.通过静态吸附-解吸实验比较了 D101、D4020、GDX201、HPD80、AB-8五种大孔吸附树脂对竹柳黄酮的吸附率和解吸率,选择了适宜的大孔吸附树脂AB-8,从上样浓度、上样流速、洗脱液乙醇浓度和洗脱流速四个方面研究了 AB-8大孔吸附树脂纯化竹柳黄酮的工艺条件,得到最优的纯化工艺为上样浓度1.0 mg/mL、上样流速1.0mL/min、洗脱液乙醇浓度70%、洗脱流速0.5mL/min,经纯化后,样品黄酮含量由11.8%提高到30.9%,提高了近2倍。3.利用LCMS-IT-TOF技术,对竹柳中的黄酮类化合物进行分析,分离得到六种黄酮类化合物,通过质谱得到的一、二级质谱信息,对这六种成分结构进行了推测,并与获得的黄酮标准品进行对照,鉴定出其中五种成分分别为异牡荆素-7-O-葡萄糖苷、芦丁、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、芹黄素-7-O-葡萄糖醛酸苷。采用高速逆流色谱法制备第六种黄酮成分,以正丁醇:乙酸乙酯:甲醇:水(1.5:4:1:7)为溶剂系统,制备第六种黄酮成分,经高效液相色谱测其纯度为92.5%,借助红外光谱和核磁共振波谱技术,推测其为金圣草素-葡萄糖醛酸苷。
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