论文部分内容阅读
趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4在胚胎发育、肿瘤细胞转移及介导免疫缺陷病毒(HIV)感染等方面起着重要作用。最近研究表明SDF-1α在动脉粥样硬化斑块中高表达,SDF-1α/CXCR4与动脉粥样硬化的关系已经引起重视。本研究首先探讨ox-LDL对内皮细胞上SDF-1α表达的影响,然后用SDF-1α处理的THP-1单核细胞上对CXCR4的表达进行研究,最后对SDF-1α/CXCR4在单核细胞/血管内皮细胞黏附的作用进行研究。目的: ox-LDL对内皮细胞SDF-1α表达的影响;SDF-1α对THP-1单核细胞上CXCR4表达的影响;SDF-1α和CXCR4抗体干预对THP-1单核细胞与内皮细胞黏附的影响;以便探讨SDF-1α促进单核细胞与内皮细胞黏附作用的机制。方法:RT-PCR检测SDF-1α和CXCR4 mRNA的表达,Western blot检测其蛋白表达变化,观察ox-LDL对内皮细胞上SDF-1α表达的剂量和时间效应,观察SDF-1α对THP-1单核细胞CXCR4表达的影响。用静态黏附实验来研究THP-1与内皮细胞的黏附,用25μg/ml ox-LDL或不同浓度SDF-1α处理内皮细胞48h或30min后,将THP-1单核细胞与内皮细胞共孵育后洗脱检测黏附作用,并加用不同浓度的CXCR4抗体阻断。结果:SDF-1α在正常的血管内皮细胞上几乎不表达,ox-LDL可以上调内皮细胞上SDF-1α表达,0-125μg/ml ox-LDL处理48h,随ox-LDL浓度增加,SDF-1α的表达亦逐渐增强,当ox-LDL浓度为25μg/ml处理48h,SDF-1α表达到达峰值。用25μg/ml ox-LDL与内皮细胞孵育0-48h,随着处理时间的延长,SDF-1α表达逐渐的增强,在48h时,SDF-1α的表达达到最大。100ng/ml SDF-1α可以上调THP-1单核细胞上CXCR4的表达。Ox-LDL可以增强THP-1与内皮细胞的黏附,25μg/ml ox-LDL处理组THP-1与内皮细胞的黏附细胞数最多,但可被CXCR4抗体所抑制。经外源性SDF-1α处理的内皮细胞与THP-1的黏附数明显增多,同样可被CXCR4抗体所抑制。结论:ox-LDL可以使内皮细胞上SDF-1α表达增强,SDF-1α可以上调THP-1单核细胞上CXCR4表达,SDF-1α通过上调单核细胞CXCR4表达促进单核细胞与内皮细胞黏附。