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结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(mycobacterium–tuberculosis,MTB)引起的传染性疾病，结核病的临床诊断方法主要分为三大类:细菌学检查、分子生物学检查和免疫学检查，其中免疫学检查以准确性高、操作简便而备受关注。近年来，免疫学检查中γ-干扰素（IFN-γ）释放试验(Interferon Gamma ReleaseAssay, IGRA)因高灵敏度和特异性而引起了人们的兴趣。IGRA基于酶联免疫斑点试验（ELISPOT）最早被广泛应用，世界卫生组织（WHO）推荐两种结核病诊断试剂QFT-G试剂盒和T-SPOT.TB试剂盒均基于ELISPOT。IGRA是采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法定量检测全血在结核分枝杆菌特异性抗原刺激下释放IFN-γ的水平，用于诊断结核分枝杆菌感染以及结核病。其检测原理是采用夹心法原理进行检测，衡量特异性抗原介导的细胞免疫反应强度。通过结核分枝杆菌特异性抗原刺激结核分枝杆菌感染者特异性T淋巴细胞并使其增殖，释放IFN-γ。用IFN-γ抗体包被磁微粒，辣根过氧化物酶标记IFN-γ抗体制备酶结合物。通过免疫反应形成抗体-抗原-抗体复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与IFN-γ的含量成正比。本研究基于IGRA建立一种化学发光方法，并将其应用于结核病诊断。化学发光方法通过磁微粒混悬液制备，酶结合物制备，校准品制备，反应体系优化，正常参考值确定，稳定性研究建立而成。该方法应用于结核病诊断的研究主要通过与临床确诊信息对比，考核化学发光方法应用于结核病诊断的灵敏度、特异性和准确性指标，以OxfordImmunotec Ltd生产的T-SPOT.TB试剂盒作对照，考核化学发光方法应用于结核病诊断与T-SPOT.TB试剂盒的阳性符合率、阴性符合率和总符合率。建立的化学发光方法将检测时间缩短为30分钟，该化学发光方法应用于结核病诊断中，与临床确诊结果对比，灵敏度为86.19%（69/81），特异性为84.26%（589/699），准确性为84.36%（658/780）。以T-SPOT.TB试剂盒作标杆，该化学发光方法应用于结核病诊断与T-SPOT.TB试剂盒的阳性符合率为85.88%（225/262），阴性符合率为81.44%（215/264），总符合率为83.65%（440/526）。本研究通过建立化学发光方法应用于结核病的诊断，缩短了检测时间，提高了检测线性范围，更加灵敏和特异，并且对环境没有污染。为今后结核病诊断使用化学发光方法奠定基础。