乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)人群感染率高，除急性感染外容易引起慢性化，并可导致肝硬化和肝细胞肝癌等一系列肝脏损害及疾病。HBV慢性化的一个主要标志是其表面抗原(Hepatitis B surface antigen，HBsAg)在宿主血清中持续存在超过6个月。持续表达的HBsAg成为慢性乙肝的重要标志，但HBsAg的致病机制尚未被完全揭示。因此，阐明慢性HBV感染的致病机制和清除HBsAg对宿主的影响，一直是人们所关心的问题。为研究HBsAg持续表达对宿主的影响，本研究第一部分选择用来自我国患者的HBV毒株基因组建立的转基因鼠及对照鼠为模型，运用差异蛋白质组学方法，分析了HBsAg阳性鼠的肝脏蛋白表达谱，并鉴定出93个差异表达的蛋白。对鉴定出的蛋白进行功能分类，发现接近45％的差异蛋白属于物质和能量代谢相关的酶类。HBsAg构成的HBV包膜含有大量脂质，其中约25％是宿主细胞来源的脂类，最近研究发现宿主脂类水平会影响到HBsAg的表达，因此，我们推测持续大量表达的HBsAg也会影响宿主脂类代谢，继而影响到其他物质代谢。在本研究第二部分中，结合HBsAg转基因鼠基因差异表达谱的研究结果，对转基因鼠肝脏蛋白差异表达谱结果中代谢相关的蛋白进行分析，将HBsAg对宿主代谢通路的影响归纳为以下三个方面：1．胆固醇合成途径增强，其代谢去路中胆汁酸合成途径减弱；2．糖酵解途径减弱，糖异生途径增强；3．氨基酸分解代谢增强。为证实HBsAg对宿主代谢途径的影响和其结果，对转基因鼠血清部分相关的临床生化指标测定和分析。结果发现，由于HBsAg形成的HBV包膜对宿主肝细胞脂质的大量消耗，动物血脂水平的总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白均下降，而氨基酸倾向分解代谢以保障必要的能量供给。HBsAg影响宿主肝脏物质代谢途径和水平，一方面损害了宿主的正常生理活动，成为乙肝慢性化的病理生理学基础；另一方面，上述变化也可能是支持HBsAg大量表达和分泌的基础。本研究第三部分选取了一个具有重要功能的差异蛋白——亲环素A(cyclophilin A，CypA)进行验证和研究，旨在阐明其在HBsAg致病过程中的潜在意义。在小鼠肝脏和HBsAg稳定表达的细胞系中验证了HBsAg引起细胞内CypA下降的现象，这一结论也被RNA干扰实验结果所印证。另外，免疫共沉淀实验和序列分析证实HBsAg和CypA存在相互作用。在CypA对HBsAg表达影响的研究中发现，干扰RNA降低细胞内CypA含量能促进HBsAg分泌，过表达外源CypA却抑制HBsAg分泌。初步结果显示，在部分HBsAg阳性的临床肝脏标本中CypA含量下降。对此现象机制的研究发现，HBsAg引起细胞内CypA含量下降，不是通过基因转录水平的改变，而是促进了后者的分泌。最新研究报道，分泌的CypA具有趋化中性粒细胞和淋巴细胞，促进炎症反应的功能。通过转基因鼠肝脏HE染色，观察到少量视野存在炎性细胞浸润，是否可能是HBsAg通过促进CypA分泌介导慢性炎症反应还需进一步证实。本研究揭示了，(1)在乙肝慢性感染中HBsAg通过改变宿主代谢通路水平利于自身表达和分泌，损害了宿主的正常生理活动，成为乙肝慢性致病的病理生理学基础；(2)HBsAg通过促进CypA分泌，可能会介导炎性细胞浸润，产生慢性炎症反应；并通过调控细胞内CypA含量介导自身正反馈分泌机制。通过这些发现，提出了HBsAg潜在的新致病机制，为深入研究奠定了基础。