氨单加氧酶基因(amoA)在氨氧化细菌种群分析和定量检测中的应用研究

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该文以两个污水处理系统的活性污泥样品为实验对象,运用MPN-PCR法对其中的氨氧化细菌进行快速定量检测,同时通过测定水样中氨氮含量的变化来推算硝化速率.研究表明,生物脱氮系统中硝化细菌的数量和活性可以作为判断该系统生物脱氮效果好坏的重要标准.氧氧化细菌是硝化菌群的一个重要组成部分,它的种类随生境差异而有所不同.为了分析污水处理系统中氨氧化细菌的种群组成,筛选合成了一对对氨氧化细菌amoA基因特异结合的引物序列,利用PCR技术对从活性污泥中抽提的细菌总DNA进行扩增,结合TA克隆和DNA测序技术,得到不同重组子amoA序列片段.运用BLAST程序将测序结果与基因库中的公开序列进行比较,发现在该污水处理系统中分布有大量Nitrosomonas属细菌,其中最主要的是Nitrosomonas europaea菌种.由此推测Nitrosomonas属细菌在该系统的氨氧化过程中起主导作用.进一步运用Clustal W软件对Nitrosomonas属下不同菌种的amoA基因片段的同源性进行比较,并采用PHYLIP软件包对amoA基因的系统发育关系进行研究,建立了十个菌种的系统发育进化树.
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